"MDA-MB-361:人乳腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H1618細胞類似產(chǎn)品：：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞

SW-756細胞類似產(chǎn)品：：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞

CAL27細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞

NBL-2細胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：該細胞源自４０歲女性乳腺癌的腦轉(zhuǎn)移組織。

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

F442-A細胞類似產(chǎn)品：：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞

HCT8細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞

BNCL2細胞類似產(chǎn)品：：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞

培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制HAO的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋HAO凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做HAO標記；６)凍存：在殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。

細胞傳代方法： １：２—１：６傳代，每周換液２—３次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：松散貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當(dāng)補液時，需避免反復(fù)吹打。

NCI-157細胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞

HR1K細胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞

SK-RC-52細胞類似產(chǎn)品：：SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞

Hs 606細胞類似產(chǎn)品：：L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞

NCIH841細胞類似產(chǎn)品：：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞

U118-MG細胞類似產(chǎn)品：：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞

BALL-1細胞類似產(chǎn)品：：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞

NCI-H23細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞

WEHI164細胞類似產(chǎn)品：：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞

WM-239-A細胞類似產(chǎn)品：：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞

P30-OHKUBO細胞類似產(chǎn)品：：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞

HPB/ALL細胞類似產(chǎn)品：：SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞

Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞類似產(chǎn)品：：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞

NCIH1299細胞類似產(chǎn)品：：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

AM38細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞

AM38細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞

COLO-680N細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞

MSTO211H細胞類似產(chǎn)品：：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞

NCI-522細胞類似產(chǎn)品：：SR細胞、He La細胞、TE14細胞

BLO 11細胞類似產(chǎn)品：：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞

SACC-LM細胞類似產(chǎn)品：：HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞

University of Arizona Cell Culture-812細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞

C4-2 B細胞類似產(chǎn)品：：AR41P細胞、EB-3細胞、Panc-813細胞

MDA-MB-361:人乳腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

U-373 MG細胞類似產(chǎn)品：：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞

U-343MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞

NRK-49F細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞

Pro-5WgaRI3C細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞

Line 870 Emory University-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞

HO-8910細胞類似產(chǎn)品：：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞

NK92細胞類似產(chǎn)品：：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞

BJA-B-1細胞類似產(chǎn)品：：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞

CMT 167細胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞

UO.31細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞

IGROV細胞類似產(chǎn)品：：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞

JIMT-1細胞類似產(chǎn)品：：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞

PLC PRF 5細胞類似產(chǎn)品：：RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞

CCRF-CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞

HCC-1954BL細胞類似產(chǎn)品：：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞

HET1A細胞類似產(chǎn)品：：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞

Swiss-3T3細胞類似產(chǎn)品：：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞

A172細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞

10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞

HCC-202細胞類似產(chǎn)品：：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞

RIMEC細胞類似產(chǎn)品：：AKR細胞、H-2081細胞、H8細胞

NK92MI細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞

EST81細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞

MES23.5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞

CAL 78細胞類似產(chǎn)品：：SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞

RAW-264.7細胞類似產(chǎn)品：：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞

MDA-MB-468細胞類似產(chǎn)品：：V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞

H1915細胞類似產(chǎn)品：：MNNG/HOS細胞、AD293細胞、SCC 25細胞

Evsa T細胞類似產(chǎn)品：：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞

Emory University-2細胞類似產(chǎn)品：：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞

RMS1598細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞

NSH細胞類似產(chǎn)品：：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞

Loucy細胞類似產(chǎn)品：：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞

AML 12細胞類似產(chǎn)品：：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞

McA-RH 7777細胞類似產(chǎn)品：：H157細胞、Eca-109細胞、SW1222細胞

UM-UC-14細胞類似產(chǎn)品：：CF-1 MEF細胞、NIH 3T3細胞、HCC1500細胞

SK-RC-52細胞類似產(chǎn)品：：SC細胞、CNE1-LUC細胞、NCIH209細胞

HBVSMC細胞類似產(chǎn)品：：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞類似產(chǎn)品：：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞

RPMI no 8226細胞類似產(chǎn)品：：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞

HT 1376.T細胞類似產(chǎn)品：：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞

GM05384細胞類似產(chǎn)品：：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞

K-562細胞類似產(chǎn)品：：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞

RC-K8細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞

SRS-82細胞類似產(chǎn)品：：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞

KYSE 410細胞類似產(chǎn)品：：ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞

Panc 05.04細胞類似產(chǎn)品：：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞

U87-MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞

LS 174T細胞類似產(chǎn)品：：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞

J-774細胞類似產(chǎn)品：：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞

H358細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞

GMK,BSC-1細胞類似產(chǎn)品：：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞

CaES-17細胞類似產(chǎn)品：：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞

UMRC-2細胞類似產(chǎn)品：：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞

BHK 21細胞類似產(chǎn)品：：NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞

U-87MG細胞類似產(chǎn)品：：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞

WRL-68細胞類似產(chǎn)品：：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞

WRL-68細胞類似產(chǎn)品：：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞

COLO-320-DM細胞類似產(chǎn)品：：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞

NCIH660細胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞

COLO 357細胞類似產(chǎn)品：：MB-49細胞、PC 61-5-3細胞、AR42J細胞

USMC細胞類似產(chǎn)品：：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞

SW 780細胞類似產(chǎn)品：：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞

MESSA/Dx5細胞類似產(chǎn)品：：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞

SHEE細胞類似產(chǎn)品：：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞

NW38細胞類似產(chǎn)品：：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞

B16/F0細胞類似產(chǎn)品：：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞

PANC 203細胞類似產(chǎn)品：：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞

A-2058細胞類似產(chǎn)品：：U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞

COLO 205細胞類似產(chǎn)品：：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞

HEK293-A細胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞

LNCaP.FGC細胞類似產(chǎn)品：：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞

PC-14細胞類似產(chǎn)品：：SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞

NCI-SNU-668細胞類似產(chǎn)品：：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞

PFSK1細胞類似產(chǎn)品：：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞

ACC2細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞

NTera2 cl.D1細胞類似產(chǎn)品：：PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞

Hs-578Bst細胞類似產(chǎn)品：：MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞

TEC細胞類似產(chǎn)品：：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞

LNCaP C4-2細胞類似產(chǎn)品：：SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞

TE 671細胞類似產(chǎn)品：：SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞

MDA-MB-361:人乳腺癌復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

COV-362細胞類似產(chǎn)品：：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞

hTERT-RPE1細胞類似產(chǎn)品：：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞

Panc 03.27細胞類似產(chǎn)品：：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞

H-2135細胞類似產(chǎn)品：：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞

3T3J2細胞類似產(chǎn)品：：UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞

Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞類似產(chǎn)品：：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞

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