"NCI-H2347:人非小細胞肺癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

no-11細胞類似產品：：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞

G-Olig2細胞類似產品：：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞

SK-MEL-2-LUC細胞類似產品：：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞

H1623細胞類似產品：：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

Panc 02.03細胞類似產品：：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞

CCD-841CoN細胞類似產品：：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞

Y3-Ag1.2.3細胞類似產品：：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞

公司主營ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學來源細胞系及原代細胞，全程提供細胞系背景、生長性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件、傳代方法等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術支持，讓您實驗再無煩擾！公司由在國外工作和學習多年的留學人員創(chuàng)辦，由國內中國科學院上海生物化學與細胞生物學研究所，復旦大學，同濟大學等多名工作在線的細胞培養(yǎng)專家，提供細胞培養(yǎng)技術支持。公司依靠自身一些的技術和理念，以世界YiLiu的技術支撐陣容，提供一系列細胞相關的技術服務。為中國的生命科學事業(yè)趕超歐美，提供了重要的基石；公司將依靠自主研究開發(fā)的GAO技術GAO質量和有絕對的價格競爭力的產品，立足國內，面向世界。力爭打破國外大公司在細胞培養(yǎng)科學領域接近壟斷的地位，為中國在生命科學的這一領域一席之地。公司籌劃未來三年內，在沈陽、濟南、北京、西安、寧夏、武漢、等國內代表城市建立細胞培養(yǎng)分實驗室，以便更HAO的服務國內廣大醫(yī)院、大學、制藥企業(yè)等，你們的每一份關心和支持，都是我們前進的動力！

細胞傳代方法：１：２-１：６傳代,每周２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

alphaTC clone 6細胞類似產品：：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞

NCI-H1703細胞類似產品：：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞

SNU251細胞類似產品：：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞

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IMR32細胞類似產品：：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞

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NCI-H446細胞類似產品：：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞

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KYSE 450細胞類似產品：：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞

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