"CHO-K1:中國倉鼠卵巢復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SK-HEP-1細胞類似產(chǎn)品：：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞

VMM5細胞類似產(chǎn)品：：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞

MDA PCa 2b細胞類似產(chǎn)品：：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞

LS-180細胞類似產(chǎn)品：：COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：１９５７年，PuckTT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞，CHO-K１是CHO的一個亞克隆。CHO-K１的生長需要脯酸。

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

MDA-kb2細胞類似產(chǎn)品：：COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞

Panc 5.04細胞類似產(chǎn)品：：WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞

HEK.EBNA細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞

細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次ZuiHAO只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握HAO細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性HAO，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的點，要做HAO建系的維持必須記錄HAO細胞檔案,換液傳代和做HAO細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

HN 4細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞

HCC1500細胞類似產(chǎn)品：：OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞

RSC-364細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞

ARH 77細胞類似產(chǎn)品：：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞

IMR 32細胞類似產(chǎn)品：：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞

B95-8細胞類似產(chǎn)品：：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞

QSG-7701細胞類似產(chǎn)品：：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞

LWnt-3A細胞類似產(chǎn)品：：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞

B16F0細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞

NCTC-3960細胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞

BC-024細胞類似產(chǎn)品：：MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞

J-111細胞類似產(chǎn)品：：Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞

NCIH1693細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞

NU-GC-3細胞類似產(chǎn)品：：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞

W133細胞類似產(chǎn)品：：HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞

H2110細胞類似產(chǎn)品：：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞

H2110細胞類似產(chǎn)品：：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞

NCIH929細胞類似產(chǎn)品：：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞

KOPN8細胞類似產(chǎn)品：：HCC 94細胞、OE-19細胞、BS-C-1細胞

HS-766T細胞類似產(chǎn)品：：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞

HCC2935細胞類似產(chǎn)品：：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞

624細胞類似產(chǎn)品：：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞

H1693細胞類似產(chǎn)品：：PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞

A 2058細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞

CHO-K1:中國倉鼠卵巢復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Calu-3細胞類似產(chǎn)品：：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞

SF-539細胞類似產(chǎn)品：：SCCVII細胞、HCC4006細胞、UMR 106細胞

HLEC細胞類似產(chǎn)品：：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞

NCIH1792細胞類似產(chǎn)品：：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

SW 579細胞類似產(chǎn)品：：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞

HuNS1細胞類似產(chǎn)品：：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞

Pa18C細胞類似產(chǎn)品：：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞

CMT-167細胞類似產(chǎn)品：：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞

SK-MEL-1細胞類似產(chǎn)品：：BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞

BJAB細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞

GH 3細胞類似產(chǎn)品：：HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞

HCT/FU細胞類似產(chǎn)品：：Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞

HCC-44細胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞

Swiss-3T3細胞類似產(chǎn)品：：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞

GM-3573細胞類似產(chǎn)品：：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞

HCEC細胞類似產(chǎn)品：：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞

MRC-V細胞類似產(chǎn)品：：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞

U-2 OS細胞類似產(chǎn)品：：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞

QGY7701細胞類似產(chǎn)品：：U343細胞、CX1細胞、AM細胞

NALM-6細胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞

SCL II細胞類似產(chǎn)品：：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞

NPC-039細胞類似產(chǎn)品：：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞

MDA231-LM2-4175細胞類似產(chǎn)品：：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞

MHHCALL2細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞

KMS-11細胞類似產(chǎn)品：：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞

SUDHL2細胞類似產(chǎn)品：：L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞

NCI-H146細胞類似產(chǎn)品：：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞

WEHI3B細胞類似產(chǎn)品：：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞

hA549細胞類似產(chǎn)品：：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞

MDA.MB.231細胞類似產(chǎn)品：：PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞

PVEC細胞類似產(chǎn)品：：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞

H-2591細胞類似產(chǎn)品：：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞

ASH3細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞

HSC-T6細胞類似產(chǎn)品：：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞

PLC PRF 5細胞類似產(chǎn)品：：RLE-6TN細胞、SKCO 1細胞、P388.D1細胞

HT3細胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細胞、LNCaP.FGC細胞、HTori:3細胞

RSC-364細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-128細胞、CV-1細胞、F442-A細胞

NCI-H716細胞類似產(chǎn)品：：GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞

A2780CP細胞類似產(chǎn)品：：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞

PL-9細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞

H-2195細胞類似產(chǎn)品：：H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞

U266 B1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞

BE(2)M-17細胞類似產(chǎn)品：：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞

Fao細胞類似產(chǎn)品：：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞

343MG細胞類似產(chǎn)品：：Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞

MCF 7B細胞類似產(chǎn)品：：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞

CV-1 in Origin Simian-7細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞

NCI-SNU-761細胞類似產(chǎn)品：：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞

RCC10 RGB細胞類似產(chǎn)品：：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞

SK-RC 42細胞類似產(chǎn)品：：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞

HBVSMC細胞類似產(chǎn)品：：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞

HN13細胞類似產(chǎn)品：：16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞

TE85細胞類似產(chǎn)品：：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞

MPASMC細胞類似產(chǎn)品：：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞

8305-C細胞類似產(chǎn)品：：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞

H-125細胞類似產(chǎn)品：：U937細胞、MV4II細胞、P388細胞

H-1792細胞類似產(chǎn)品：：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞

H-1792細胞類似產(chǎn)品：：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞

MCF-7ADR細胞類似產(chǎn)品：：Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞

H-87細胞類似產(chǎn)品：：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞

CORL279細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞

A375-MEL細胞類似產(chǎn)品：：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞

PC-3M 2B4細胞類似產(chǎn)品：：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞

B5537SKIN細胞類似產(chǎn)品：：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞

UCLA SO M14細胞類似產(chǎn)品：：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞

P3/NSI/1-AG4-1細胞類似產(chǎn)品：：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞

L02細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞

H-2141細胞類似產(chǎn)品：：67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞

B16BL-6細胞類似產(chǎn)品：：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞

H1522細胞類似產(chǎn)品：：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞

SupT1細胞類似產(chǎn)品：：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞

Hs 675.T細胞類似產(chǎn)品：：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞

Hep 3B2細胞類似產(chǎn)品：：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞

Hu-P-T3細胞類似產(chǎn)品：：OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞

GalK 1細胞類似產(chǎn)品：：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞

CX-1細胞類似產(chǎn)品：：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞

H9c2(2-1)細胞類似產(chǎn)品：：MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞

IMR-32細胞類似產(chǎn)品：：BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞

NBL-12細胞類似產(chǎn)品：：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞

JVM2細胞類似產(chǎn)品：：YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞

EA.Hy926細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞

CHO-K1:中國倉鼠卵巢復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

L M (TK-)細胞類似產(chǎn)品：：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞

LED-WiDr細胞類似產(chǎn)品：：SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞

WI-38細胞類似產(chǎn)品：：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞

MADB106細胞類似產(chǎn)品：：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞

NS1-Ag4/1細胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞

AML 12細胞類似產(chǎn)品：：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞

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