"G-Olig2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎干細胞

細胞背景資料：胚胎干細胞；１２９X１/SvJ

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數板計數后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

Ramos (RA)細胞類似產品：：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞

32Dcl3細胞類似產品：：NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞

MNNGHOS細胞類似產品：：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞

SW 837細胞類似產品：：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞

NCI-H2107細胞類似產品：：MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞

G-Olig2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎干細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

預防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每周更換），待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

T98G細胞類似產品：：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞

NCI-H-69細胞類似產品：：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞

HRIF細胞類似產品：：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞

HANK1細胞類似產品：：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞

NCIH3255細胞類似產品：：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

G-Olig2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎干細胞

細胞生長特性：貼壁

OVCAR 433細胞類似產品：：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞

HEK 293 EBNA細胞類似產品：：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞

OK細胞類似產品：：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞

OSC19細胞類似產品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

CACO2細胞類似產品：：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞

COLO 394細胞類似產品：：HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞

如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數，調整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但ZuiHAO為對數生長期細胞。在凍存前一天ZuiHAO換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做HAO防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇ZuiHAO用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。

細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數/１００個細胞。一般細胞分裂指數介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO時期，稱指數增生期(對數生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋HAO瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。

RINm-5F細胞類似產品：：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞

CESS細胞類似產品：：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞

H-1703細胞類似產品：：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞

DMS-79細胞類似產品：：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞

PC 61 5.3細胞類似產品：：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞

3T3(A31)細胞類似產品：：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞

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Cloudman S91 melanoma細胞類似產品：：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞

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Laboratory of Allergic Diseases 2細胞類似產品：：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞

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Lu99A細胞類似產品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

BC-028細胞類似產品：：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞

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FOXNY細胞類似產品：：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞

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DMS153細胞類似產品：：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞

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SR786細胞類似產品：：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞

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CAOV3細胞類似產品：：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞

NCIH1876細胞類似產品：：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞

U 138 MG細胞類似產品：：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞

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Chinese Hamster Lung細胞類似產品：：H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞

MB231細胞類似產品：：MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞

NCI-H735細胞類似產品：：OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞

BE(2)C細胞類似產品：：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞

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MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞類似產品：：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞

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alpha-TC1-6細胞類似產品：：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞

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G-Olig2 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠胚胎干細胞

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