HBsAg（乙型肝炎表面抗原）是HBV（乙型肝炎病毒）唯1的脂質(zhì)相關(guān)包膜蛋白，作為細(xì)胞附著和進入介質(zhì)，是提供HBV免疫后中和抗體的主要靶標(biāo)。盡管HBsAg在誘導(dǎo)保護性免疫中發(fā)揮中心作用，但缺乏比較不同HBsAg及其檢測抗-HBs抗體能力的研究。此外，已建立的各種耗時復(fù)雜的HBsAg生產(chǎn)協(xié)議，導(dǎo)致結(jié)構(gòu)和功能上未充分表征的HBsAg。
近期, Michael等發(fā)表的標(biāo)題為“A novel method for recombinant mammalian-expressed S-HBsAg virus-like particle production for assembly status analysis and improved anti-HBs serology”，發(fā)表在《Protein Science》期刊上，該研究介紹了一種新的方法，用于生產(chǎn)重組哺乳動物表達(dá)的S-HBsAg病毒樣顆粒（VLPs），旨在分析組裝狀態(tài)并改進抗-HBs血清學(xué)。
本研究提出了一種易于執(zhí)行、簡化和穩(wěn)健的方法，通過瞬時表達(dá)在哺乳動物細(xì)胞中和從細(xì)胞裂解物中純化，以展示表面均勻的抗原表位，以改進抗-HBs抗體的血清學(xué)檢測。
方法：
研究者們開發(fā)了一種在哺乳動物細(xì)胞中通過瞬時表達(dá)重組S-HBsAg VLP的方法，并從細(xì)胞裂解物中純化，目的是在表面展示均勻的抗原表位，以改進血清學(xué)檢測抗-HBs抗體。他們不僅比較了通過透射電子顯微鏡和質(zhì)譜光度法分析的S-HBsAg和常用的HBsAg參考樣本的組裝狀態(tài)和顆粒組成，而且還評估了它們的抗原質(zhì)量和功能性，以檢測抗-HBs抗體，以確定最適合于血清學(xué)篩查的樣本。
實驗：
實驗中，研究者們首先設(shè)計了S-HBsAg表達(dá)載體，使用HEK293-6E細(xì)胞系進行瞬時基因表達(dá)。通過polyethyleneimine進行轉(zhuǎn)染，以表達(dá)S-HBsAg。細(xì)胞裂解后，通過親和色譜法純化S-HBsAg。純化后的S-HBsAg通過NH4SCN處理形成VLPs，并通過GSH/GSSG在37°C下孵化以成熟VLPs上的表位。使用質(zhì)譜光度法（MP）和透射電子顯微鏡（TEM）評估生產(chǎn)的HBsAg VLPs的組裝狀態(tài)，通過質(zhì)量和大小進行比較。此外，通過基于珠子的多重技術(shù)，比較了S-HBsAg VLPs與血清和酵母衍生的商業(yè)HBsAg樣本，以檢測來自個體捐贈者以及國際抗-HBs免疫球蛋白標(biāo)準(zhǔn)和抗-HBs質(zhì)量控制樣本的抗-HBs抗體。
艾美捷Jena Bioscience--HBsAg adw1 24 kDa（#PR-1402）的作用和價值：
在實驗中，HBsAg adw1 24 kDa作為一個商業(yè)對照樣本，用于評估新方法生產(chǎn)的S-HBsAg VLPs的性能。這個樣本是從酵母中提取的重組HBsAg，用于比較其在檢測抗-HBs抗體方面的能力。通過比較Jena Bioscience的HBsAg與研究者們生產(chǎn)的S-HBsAg VLPs，可以評估新方法的有效性和潛在的改進。
Jena Bioscience的HBsAg adw1 24 kDa的價值在于它提供了一個行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，用于比較新開發(fā)的S-HBsAg VLPs。這種比較對于驗證新方法的敏感性和特異性至關(guān)重要，因為它允許研究者們評估他們的產(chǎn)品在實際應(yīng)用中的性能。此外，這種商業(yè)HBsAg樣本的使用，也有助于理解不同生產(chǎn)方法對HBsAg結(jié)構(gòu)和功能的影響，這對于改進疫苗和診斷工具的開發(fā)具有重要意義。
結(jié)論：
研究結(jié)果表明，與酵母或血清HBsAg相比，S-HBsAg VLPs在多重血清學(xué)中檢測抗-HBs抗體時顯示出最高的敏感性和特異性，使其成為通過抗-HBs血清狀態(tài)分析HBV免疫最適合的抗原。這項研究不僅提供了一種改進的HBsAg VLPs生產(chǎn)方法，而且還通過直接比較不同HBsAg樣本在一種測定格式中的性能，為HBV免疫分析提供了寶貴的見解。
通過這項研究，我們可以得出結(jié)論，新方法生產(chǎn)的S-HBsAg VLPs在質(zhì)量和功能性上都優(yōu)于現(xiàn)有的商業(yè)HBsAg樣本，包括Jena Bioscience的HBsAg adw1 24 kDa。這表明新方法有潛力改進HBV免疫分析，為未來的疫苗開發(fā)和疾病控制策略提供支持。
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