ACROBiosystems百普賽斯致力于開發(fā)高質(zhì)量的、應(yīng)用于CGT臨床階段的相關(guān)試劑/原料，基于完善的GMP質(zhì)量管理體系，現(xiàn)全新推出GMP級別重組DLL4蛋白（貨號：GMP-DL4H28），具有高活性、高安全性等，可用于Feeder-cell free培養(yǎng)方案下的iPSC-T細胞誘導分化過程中，更好支持iPSC大規(guī)模臨床生產(chǎn)。
以CAR-T為代表的細胞免疫療法，已在多種血液惡性腫瘤的治療中表現(xiàn)出優(yōu)秀的臨床效果，目前已有多款CAR-T藥物獲批上市，其中，T淋巴細胞是細胞免疫療法藥物開發(fā)的關(guān)鍵介質(zhì)，然而主流的自體細胞療法存在一些明顯的關(guān)鍵性障礙，如T細胞不易獲?。馨图毎麥p少癥患者）、大規(guī)模制造困難以及無法通用性治療等問題，因此，獲取足夠數(shù)量的T細胞用于臨床生產(chǎn)至關(guān)重要。為克服這一挑戰(zhàn)，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，可通過多種細胞類型來衍生獲取T細胞，如臍帶血（UCB）造血干細胞、骨髓（BM）造血干細胞、胚胎干細胞(ESC)、誘導多能干細胞（iPSC）等來源，其中，iPSCs因其獨特的自我更新特性以及被基因工程編輯的能力，有潛力提供T細胞的可再生來源，為細胞治療提供“無限供應(yīng)”的平臺。
DLL4在iPSC- T誘導分化中的關(guān)鍵作用
經(jīng)典的iPSC來源T細胞分化方案是將來自健康供體的iPSCs與小鼠骨髓基質(zhì)細胞系OP9共培養(yǎng)，以產(chǎn)生CD34+的造血祖細胞，然后被富集后與特定生長因子（如SCF、Flt3、IL-7、IL-3、TPO）和過表達DLL1或DLL4的OP9細胞系共培養(yǎng)，啟動T細胞分化，最終得到iPSC誘導分化的T細胞。
我們不難注意到DLL4/DLL1在整個分化過程中起到了關(guān)鍵作用，這主要是因為T細胞分化依賴Notch信號通路來完成。實際上，Notch受體-配體相互作用決定了多個細胞譜系的發(fā)育過程，尤其在T淋巴細胞生成過程中，幾乎完全是由 Notch1 和 Delta 樣 (DLL)4相互作用來介導，在上述iPSC誘導分化培養(yǎng)過程中，HPC上表達的受體 Notch1與OP9-DL細胞上表達的DLL4/DLL1相互作用，從而誘導一系列T細胞譜系分化步驟。
不過在體外培養(yǎng)時，DLL4 和DLL1 均顯示支持 T 淋巴細胞生成, 為了確定哪種 DLL在體外誘導造血祖細胞產(chǎn)生T譜系細胞方面更有效，有研究團隊做了更深入研究，他們制備了一系列表達水平(lo/med/hi)的DLL4和DLL1的OP9 細胞，用于HPC向T細胞的誘導分化中，結(jié)果顯示，盡管 OP9-DL4hi和OP9-DL4med 細胞上的Dll4-HA的細胞表面蛋白水平分別低于OP9-DL1hi和OP9-DL1med上的 DLL11-HA 水平，但表達DLL4 的細胞能更有效地支持T細胞生成，這表明DLL4在HPC向T淋巴細胞誘導方面比DLL1更有效。
所以，OP9-DL是iPSC-T誘導分化中必不可缺的材料，但使用鼠源基質(zhì)細胞系及一些未定義的某些提取物會導致安全性問題而被限制臨床應(yīng)用，目前，基于重組DLL4蛋白的Feeder-cell free培養(yǎng)已成為臨床iPSC規(guī)?；a(chǎn)的主流方案，如使用板子結(jié)合Notch配體DLL4和一些粘附分子（如VCAM-1），具有更好的臨床轉(zhuǎn)化潛力，更有研究團隊考慮到板結(jié)合的方法受到組織培養(yǎng)板表面積的限制，認為這依舊對大規(guī)模生產(chǎn)提出了挑戰(zhàn)，開發(fā)出基于DLL4微珠的Feeder-cell free體外系統(tǒng)，來更好支持iPSC大規(guī)模懸浮培養(yǎng)。
總結(jié)
iPSC-T細胞作為“現(xiàn)貨型”的T細胞來源，可用作下游如CAR轉(zhuǎn)導、TCR工程化構(gòu)建修飾等生產(chǎn)中，有研究顯示，基于Feeder-cell free條件，能達到1L約2 × 1010個的iT細胞培養(yǎng)水平，這個數(shù)字足以進行安全性評估的初步臨床試驗，且相比于自體T細胞，更有解決同種異體細胞治療引起的免疫排斥反應(yīng)的優(yōu)勢，iPSC-T細胞或?qū)⒊蔀門細胞免疫療法的理想通用細胞源。iPSC誘導分化對T細胞的體外規(guī)?；a(chǎn)和持續(xù)進步產(chǎn)生了巨大的影響，隨著對其質(zhì)量控制和誘導分化工藝的不斷優(yōu)化，iPSC有望在免疫療法領(lǐng)域釋放巨大潛力。
明星產(chǎn)品—GMP級別重組DLL4蛋白
ACROBiosystems百普賽斯致力于開發(fā)高質(zhì)量的、應(yīng)用于CGT臨床階段的相關(guān)試劑/原料，基于完善的GMP質(zhì)量管理體系，現(xiàn)全新推出GMP級別重組DLL4蛋白（貨號：GMP-DL4H28），具有高活性、高安全性等，可用于Feeder-cell free培養(yǎng)方案下的iPSC-T細胞誘導分化過程中，更好支持iPSC大規(guī)模臨床生產(chǎn)。