Proteinase K（蛋白酶K）是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，其相對分子量約為29.3 kDa，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K應(yīng)用廣泛，可用于制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實驗，而變性劑如SDS（1%）可提高其活性，常用工作濃度為50-100 µg/mL，根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。
產(chǎn)品性質(zhì)：
1）本品來源于基因重組酵母菌株；
2）純度（Native PAGE電泳檢測）：≥95%；
3）比活性值（Specific activity）：≥30 U/mg蛋白；
4）不含RNase和DNase；
5）在尿素和SDS中活性穩(wěn)定存在；
6）在較廣的pH范圍內(nèi)（pH 4.0 – 12.0）均有活性，pH范圍為pH 7.5 - 9.0；
7）反應(yīng)條件：反應(yīng)緩沖液中37℃ - 70℃溫育1 h。推薦反應(yīng)溫度選擇70℃；
8）活力單位定義：在37℃，pH 7.5的條件下，每分鐘釋放1 µM酪氨酸所需要的Proteinase K量定義為1個活性單位；
9）失活方法：反應(yīng)體系中加入PMSF或DFP抑制劑即可失活，65℃溫育10-15 min可部分失活。
運輸和保存方法：
冰袋運輸。4℃干燥保存，有效期3年。更長期保存，可置于-20℃冷凍保存。
使用方法
1. 20-40 mg/mL Proteinase K儲存液的配制
1）將干粉溶解于稀釋緩沖液中，配制成40-80 mg/mL原液；
【注】：稀釋緩沖液配方：20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2。
2）使用低蛋白吸附的0.22 µm濾器過濾除菌；
3）加入等體積無菌甘油，配制成含50%甘油的Proteinase K儲存液。
【注】：Proteinase K儲存液4℃保存1年。若需反復(fù)使用，需分裝保存。
- 按照核酸提取說明書添加指定量Proteinase K儲存液即可。
注意事項：
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）啟用后如需反復(fù)使用，需置于-20℃～-80℃冰箱冷凍或者配制成溶液后過濾除菌分裝保存。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！
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