引言
基因遞送系統(tǒng)需高效、安全地將基因遞送至靶細(xì)胞。季銨化殼寡糖(HTCOSC)作為陽離子多糖,可通過靜電作用結(jié)合DNA,形成納米復(fù)合物。Cy5.5標(biāo)記的HTCOSC(Cy5.5-HTCOSC)可實時追蹤基因遞送過程,優(yōu)化遞送效率。
主體內(nèi)容
- 基因遞送系統(tǒng)構(gòu)建
- 復(fù)合物制備:Cy5.5-HTCOSC與pEGFP-N1質(zhì)粒(DNA)通過靜電作用形成納米復(fù)合物,粒徑約150 nm,ζ電位+28 mV。
- 穩(wěn)定性分析:在含10%血清的培養(yǎng)基中,復(fù)合物粒徑48小時內(nèi)增加<10%,顯示良好的穩(wěn)定性。
- 體外轉(zhuǎn)染實驗
- 細(xì)胞攝取:HeLa細(xì)胞對Cy5.5-HTCOSC/DNA復(fù)合物的攝取量是未修飾組的4.1倍。
- 轉(zhuǎn)染效率:復(fù)合物處理48小時后,綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)陽性細(xì)胞率達(dá)65%,顯著高于未修飾組(28%)。
- 機(jī)制:共聚焦顯微鏡顯示復(fù)合物通過網(wǎng)格蛋白依賴的內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞,并在溶酶體中逃逸。
- 體內(nèi)基因遞送研究
- 組織分布:靜脈注射復(fù)合物至小鼠后,肝臟和脾臟的熒光信號強(qiáng)度分別是肺的3.2倍和2.5倍,提示復(fù)合物在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的富集。
- 基因表達(dá):通過qPCR檢測,肝臟中GFP mRNA水平是未修飾組的5.8倍,表明復(fù)合物成功遞送基因至靶器官。
結(jié)論
Cy5.5-HTCOSC通過熒光成像引導(dǎo)基因遞送,顯著提升了轉(zhuǎn)染效率和靶向性。未來可探索其在腫瘤基因治療或遺傳病治療中的應(yīng)用。
相關(guān)產(chǎn)品:
Cyanine5-Resveratrol,Cy5-白藜蘆醇Cy5-PEG-Maleimide,Cyanine5-PEG-MAL,MW:10000
Cy5 tetrazine
Sulfo Cy5 alkyne
Cy5-溶菌酶
Cyanine5 hydrazide
Sulfo-Cyanine5 amine
Sulfo-Cyanine5 maleimide
Cyanine5-Chloramphenicol
BSA-CY5.5
Cy5.5DBCO
CY5.5NHS
CY5.5-Streptavidin
cy5.5-甘氨鵝脫氧膽酸
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