糖基化修飾
糖基化修飾是真核細(xì)胞內(nèi)常見的翻譯后修飾，指一個(gè)或多個(gè)糖基通過共價(jià)鍵連接到蛋白質(zhì)分子上。這種修飾對(duì)蛋白質(zhì)的折疊、穩(wěn)定性、活性以及細(xì)胞間信號(hào)傳遞有重要影響。
蛋白質(zhì)的糖基化修飾主要分位兩類：N-連接糖基化和O-連接糖基化。N-連接糖基化的糖鏈連接在NXT/S(其中X是除脯氨酸外的任意氨基酸)的N(天冬酰胺)上，連接在N上的寡糖鏈又分為高甘露糖型，雜合型和復(fù)合型三種。
圖1. N-連接糖基化三種類型
然而，糖基化也可能帶來一些問題：
（1）糖基化會(huì)降低蛋白質(zhì)的均一性，影響蛋白質(zhì)的結(jié)晶；
（2）重組表達(dá)的糖蛋白和抗體糖型與人體內(nèi)糖型的差異可能引發(fā)免疫排斥反應(yīng)；
（3）異常糖基化可能導(dǎo)致自身免疫疾病的發(fā)生；
（4）登革熱病毒抗體的非巖藻糖化可能引起ADE效應(yīng)（抗體依賴性增強(qiáng)效應(yīng)）。
去糖基化的糖苷酶為科研工作者研究糖蛋白以及異常糖基化引發(fā)的相關(guān)疾病研究提供有效工具。但是不同的糖苷酶對(duì)底物有不同的偏好性，切對(duì)不同糖苷酶對(duì)糖鏈的切割效率也不同。那么各種糖苷酶都有什么特點(diǎn)呢，下面我們來詳細(xì)介紹一下。
PNGase F
PNGase F (YXX04901)是一種廣譜的N-連接糖鏈切割酶，不具有氨基酸序列特異性，可以高效切割高甘露糖型，雜合型和復(fù)合型三種糖鏈。連接在天冬酰胺上的第一個(gè)GlcNAc被巖藻糖通過α(1-6)糖苷鍵連接修飾時(shí)也可以高效切割，但是在植物和部分昆蟲細(xì)胞內(nèi)，巖藻糖修飾通過α(1-3)糖苷鍵連接時(shí)，則不能切割。由于PNGase F不識(shí)別特定的氨基酸序列，所以PNGase F能夠切割變性的蛋白，且切割變性蛋白糖鏈的效率一般比切割活性蛋白糖鏈的效率還要高。
圖2. PNGase F的糖鏈切割位點(diǎn)
Endo S
Endo S (YXX05201)是一種識(shí)別Human IgG Asn 297位點(diǎn)復(fù)合型糖鏈的糖苷內(nèi)切酶，切割位置為兩個(gè)GlcNAc之間。
圖3. Endo S的糖鏈切割位點(diǎn)
CU43
與Endo S類似，CU43 (YXX25001, EXX25001)也只能識(shí)別并切割Human IgG Asn 297位點(diǎn)的糖基，能高效切割雜合型和復(fù)合型兩種糖鏈，但是切割高甘露糖型糖鏈的效率較低。
圖4. CU43的糖鏈切割位點(diǎn)
Endo S2
Endo S2 (YXX06601)能切割Human IgG Asn297上的所有三種糖鏈，殘留一個(gè)GlcNAc (和一個(gè)巖藻糖，如果有巖藻糖修飾)在Asn297上。
圖5. Endo S2的糖鏈切割位點(diǎn)
注意
Endo S，CU43和Endo S2去糖基化高度依賴Human IgG的空間結(jié)構(gòu)，如果IgG變性，則無法切割。Endo S，CU43和Endo S2無法切除Human IgA, IgM，IgE和其他物種IgG的糖鏈。
下面以表格的形式總結(jié)四種糖苷酶的特點(diǎn)：
AntibodySystem
AntibodySystem Laboratories SAS于2019年創(chuàng)立于法國(guó)斯特拉斯堡,專注于生命科學(xué)研究領(lǐng)域蛋白及抗體試劑研發(fā)生產(chǎn)。致力于為全球生命科學(xué)基礎(chǔ)研究者提供高質(zhì)量的蛋白，抗體產(chǎn)品，產(chǎn)品類別囊括傳統(tǒng)多抗，經(jīng)典內(nèi)參抗體，標(biāo)簽抗體，高活性蛋白，invivo功能性抗體，低背景流式抗體，高特異性納米抗體，特色小分子抗體，高質(zhì)量磷酸化抗體，DNA/RNA抗體,PEG抗體等十余個(gè)系列;目前AntibodySystem旗下產(chǎn)品線涵蓋500余種病毒與超級(jí)細(xì)菌，寄生蟲，腫瘤，老年癡呆，帕金森，變態(tài)與過敏反應(yīng)，免疫抑制與免疫激活等多個(gè)領(lǐng)域。
佰樂博生物
武漢佰樂博生物（Biolab Reagents）由五位畢業(yè)于華中科技大學(xué)，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，武漢大學(xué)等知名高校，且具有二十年工作經(jīng)驗(yàn)的生命科學(xué)領(lǐng)域研究者創(chuàng)立于2021年，憑借豐富的產(chǎn)品開發(fā)經(jīng)驗(yàn)，利用全球技術(shù)平臺(tái)，引進(jìn)和整合全球高品質(zhì)的蛋白、抗體和試劑盒產(chǎn)品。目前，佰樂博生物作為法國(guó)AntibodySystem和ProteoGenix在亞洲總代理，提供近30,000種生命科學(xué)試劑，核心產(chǎn)品涵蓋蛋白、抗體和試劑盒，旨在為科研工作者提供專業(yè)、全面、可靠的試劑支持，推動(dòng)生命科學(xué)研究的深入發(fā)展。