摘要：
本研究開發(fā)了一種基于DSPE-PEG-SS-Galactose的陽離子脂質體，用于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的肝細胞特異性遞送。
1. 材料合成
在DSPE-PEG-SS鏈末端引入多聚精氨酸（R8）作為基因載體，半乳糖通過點擊化學偶聯(lián)至PEG鏈遠端。脂質體/DNA復合物在N/P=6時粒徑為142±18nm，表面電荷+28.5mV。
2. 轉染效率
在Huh7細胞中，該載體介導的GFP基因轉染效率達72.3%，顯著高于商業(yè)轉染試劑Lipofectamine 3000（45.8%）。流式細胞術顯示肝細胞特異性攝取率達91.2%。
3. 基因編輯效果
針對PCSK9基因的sgRNA遞送后，T7E1實驗顯示基因編輯效率為38.7±4.2%，顯著抑制HepG2細胞中的PCSK9蛋白表達（Western blot驗證）。
4. 體內安全性
小鼠單次尾靜脈注射（5mg/kg）后，血清ALT/AST水平未見顯著升高，組織學檢查顯示肝臟無明顯炎癥反應。
5. 結論
該載體實現(xiàn)了CRISPR系統(tǒng)在肝臟的高效安全遞送，為遺傳性疾病的基因治療提供了新型非病毒載體平臺。