在操作ELISA試劑盒實驗前，不少教師會找尋許多的相關(guān)實驗資料，網(wǎng)上的資料一大堆，但是真實所能夠需求用到的技巧和留心也就那幾條，熟練的了解并掌握之后再應(yīng)用到實驗中就會簡略的多。做好這幾條，ELISA試劑盒實驗高手不是夢。
一、加樣的經(jīng)驗總結(jié)
加樣或加試劑時，請留心在吸取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時，個孔與一個孔加樣之間的時間間隔假如太大，將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時間，然后明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間控制 在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，舉薦運用多道移液器加樣。
二、孵育的三條必知
1.為避免樣品蒸發(fā)，實驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo) 板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；
2.洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀況；
3.一起應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
三、ELISA洗刷小技巧
洗刷過程中反應(yīng)孔中殘留的洗刷液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直 接放入反應(yīng)孔中吸水，一起要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響*后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
四、反應(yīng)時間的控制
參加底物后請守時查詢反應(yīng)孔的顏色改變（比如，每隔 10分鐘），如顏色較深，請?zhí)崆皡⒓又兄挂褐兄狗磻?yīng)，避免反應(yīng)過強然后影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
五、ELISA試劑盒操作說明
1.封板膜只做一次性運用。
2.標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高時先將樣本稀釋必定倍數(shù)后再測定，核算時請乘以稀釋倍數(shù)。
3.各步加樣均運用加樣器，并常常校正其正確性，一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)（標(biāo)本數(shù)目多的時分，上海研域舉薦運用排槍加樣）。
4.液體標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)逾越1個月，-80℃不應(yīng)逾越2個月；標(biāo)本溶血會影響檢測成果，因而溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。