研究表明，PI3Kδ抑制劑化合物CHMFL-PI3KD-317顯示出了良好的體內(nèi)抗B細(xì)胞相關(guān)腫瘤的功效，例如急性髓細(xì)胞性白血?。ˋML）。本文描述了一種生物電子等排取代法，來(lái)開(kāi)發(fā)新穎的2-氨基吡啶類PI3Kδ抑制劑。對(duì)類似結(jié)構(gòu)進(jìn)行構(gòu)效關(guān)系研究和生物學(xué)評(píng)價(jià)，確定了化合物MR3278是一種有效的PI3Kδ抑制劑，對(duì)體外血液細(xì)胞具有一定的抗增殖作用。

本文選擇MR3278來(lái)研究其對(duì)于人類癌細(xì)胞株的抗增殖活性，并以Idelalisib和PI-103做為陽(yáng)性對(duì)照。如圖所示，MR3278對(duì)癌癥血細(xì)胞具有中等程度的抑制活性，IC50值在2.6和18.9μM。然而，公認(rèn)的高選擇性的PI3Kδ抑制劑Idelalisib并沒(méi)有表現(xiàn)出對(duì)大多數(shù)細(xì)胞株具有顯著的抗增殖作用。反而是泛PI3K抑制劑PI-103顯示出比MR3278和Idelalisib更強(qiáng)的抗增殖功效。這可能與PI3Kδ抑制劑可能通過(guò)癌癥微環(huán)境介導(dǎo)抗腫瘤作用有關(guān)。

由于MR3278顯示出針對(duì)AML細(xì)胞優(yōu)越的抗增殖活性，選擇該化合物以進(jìn)一步研究其對(duì)細(xì)胞凋亡和周期的影響。如圖所示，MR3278以劑量依賴性的方式誘導(dǎo)Mv-4-11細(xì)胞顯著凋亡。隨著MR3278濃度從1μM增加到10μM，凋亡細(xì)胞的百分比從3.85%變到31.31%。細(xì)胞周期分析顯示MR3278劑量依賴性地使細(xì)胞周期阻滯于G2/M期。

在證實(shí)了MR3278對(duì)PI3Kδ激酶活性、抗增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響后，又通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法(WB)檢測(cè)其對(duì)Mv-4-11細(xì)胞中PI3K通路相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。如圖所示，隨著MR3278濃度的增加，AKT的磷酸化水平逐漸降低，說(shuō)明Mv-4-11細(xì)胞中PI3K通路的活性被阻斷。總之，所有這些結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了MR3278在抑制PI3Kδ激酶活性、阻斷細(xì)胞周期和引起細(xì)胞凋亡方面的有效活性。

References

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