Tris、Tris HCl、Bis-Tris的制備方法及使用注意事項
Tris（三羥甲基氨基甲烷）可用于包括TAE和TBE在內的各種緩沖溶液中。Tris也可以用于運行和加載緩沖劑，例如用于SDS-PAGE。其有效pH范圍是7.0至9.0。Tris緩沖液的兩種常見形式是Tris堿和Tris HCl。使用Tris HCl替代NaOH或HCl的其他優(yōu)點包括安全性和可重復性。
如何制作Tris和Tris HCl及使用注意事項
Tris Base和Tris HCl的制備步驟：
Tris：要制備1升1M Tris緩沖液，請將121.14 g Tris溶解在750 mL dH2O中。用濃鹽酸調節(jié)至所需的pH。pH值可以通過增加Tris HCl（酸性增加）或Tris堿（堿性增加）的摩爾比來調節(jié)并使用Hendersen-Hasselbalch方程進行估算。用dH2O填充至終體積1L，并通過過濾器或高壓釜滅菌。儲存在4?C。
Tris HCl：要制備1升1M Tris HCl緩沖液，請將157.60 g Tris HCl溶解在750 mL dH2O中。使用10N氫氧化鈉調節(jié)至所需的pH。您可以在1M Tris HCl Buffer方案中使用一張表。用dH2O填充至終體積1L，并通過過濾器或高壓釜滅菌。儲存在4?C。
使用注意事項：
使用Tris溶液的一個技巧是溶液的pH值非常依賴于溫度。因此，應在使用緩沖液的溫度下制備Tris。此外，應避免使用含Tris緩沖液的含銀的單結pH電極。
如何制作Bis-Tris及使用注意事項
Bis-Tris是Bis（2-羥乙基）胺緩沖液家族的成員。在壓力變化的實驗中，凝膠電泳實驗中以及在陰離子交換色譜法和NMR期間，您可以使用這種緩沖液來抵抗pH的變化。該緩沖液的pH范圍是5.8至7.2。
Bis-Tris制備步驟：
要制備1升1M Bis-Tris緩沖原液，請將209.24 g Bis-Tris溶解 在750 mL dH2O中。使用濃鹽酸調節(jié)至所需的pH值。您可以在Bis-Tris PDF協(xié)議中使用表格。用dH2O填充至終體積1L，并通過過濾器或高壓釜滅菌。將緩沖液存儲在4攝氏度下。
注意事項：
當使用Bis-Tris緩沖溶液時，請記住Bis-Tris與鉛，銅和其他各種金屬形成絡合物。除上述用途外，Bis-Tris可以替代作為有毒緩沖劑碳酸氫鈣的安全替代品。