4-羥乙基哌嗪乙磺酸（簡稱HEPES），分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有兩個堿性叔胺氮，所以呈現(xiàn)兩性，可用來配制兩性離子緩沖液。關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制，不同的文獻資料有不同的說法。根據(jù)用途，一般有三種，HEPES緩沖液，HEPES緩沖鹽溶液，2×HEPES緩沖鹽溶液，三種配制方法總結(jié)如下：
一、HEPES緩沖液
HEPES緩沖液通常由HEPES和堿（如NaOH）組成。以下是制備HEPES緩沖液的步驟：
（1）將119.15克HEPES溶解在400毫升蒸餾水中，確保完全溶解。
（2）使用0.5~1M的NaOH水溶液逐漸滴加，調(diào)節(jié)溶液的pH至所需范圍。需要注意的是，HEPES的有效pH緩沖范圍是6.8-8.2。
（3）將溶液定容至500毫升，使用蒸餾水進行定容。
（4）HEPES緩沖液在生物學(xué)實驗中常用于細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)表達等需要維持穩(wěn)定pH值的情況下。其優(yōu)點在于能夠在中性pH條件下工作，不會對生物樣品產(chǎn)生毒性。
二、HEPES緩沖鹽溶液
除了HEPES和堿外，HEPES緩沖鹽溶液中還包含其他離子。以下是制備HEPES緩沖鹽溶液的步驟：
（1）將6.5克HEPES、8.0克NaCl、0.198克Na2HPO4·7H2O分別稱取。
（2）使用0.5M NaOH水溶液逐漸滴加，調(diào)節(jié)溶液的pH至所需范圍。
（3）將溶液定容至500毫升，使用蒸餾水進行定容。
（4）HEPES緩沖鹽溶液通常用于一些需要特定離子濃度的實驗，例如細(xì)胞-細(xì)胞黏附實驗中含鈣、鎂離子的需要。
三、 2×HEPES緩沖鹽溶液
這是一種相對復(fù)雜的HEPES緩沖體系，適用于一些特定的實驗需求。以下是制備2×HEPES緩沖鹽溶液的步驟：
（1）將1.6克NaCl、0.074克KCl、0.027克Na2HPO4.2H2O、0.2克葡聚糖(glucan or dextran)和1克HEPES分別稱取，加入90毫升蒸餾水中，確保溶解。
（2）使用0.5M NaOH水溶液逐漸滴加，調(diào)節(jié)溶液的pH至所需范圍。
（3）將溶液定容至100毫升，使用蒸餾水進行定容。
（4）2×HEPES緩沖鹽溶液適用于一些特殊的實驗設(shè)計，例如在細(xì)胞培養(yǎng)中需要維持特定離子濃度。
HEPES 緩沖溶液具有對細(xì)胞無毒性、不易穿過生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過程等特點，所以在生化實驗中具有廣泛的應(yīng)用。湖南匯百益作為HEPES的供應(yīng)商，不僅擁有先進的生產(chǎn)設(shè)備和嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系，確保所提供的HEPES產(chǎn)品具有高純度和穩(wěn)定的性能。同時無論是在產(chǎn)品選擇、應(yīng)用指導(dǎo)還是實驗設(shè)計方面，匯百益專業(yè)團隊都能夠為客戶提供及時的幫助和解決方案。如果您有相關(guān)需求，歡迎隨時聯(lián)系我們購買！