背景^[1-5]

蛋白免疫原性分析服務可提供針對機體在使用生物藥后產(chǎn)生的抗藥抗體和中和抗體進行免疫原性實驗的檢測，旨在全力幫助客戶加快推進藥物研發(fā)項目的進展的技術(shù)性服務。提供的免疫原性檢測主要通過分步方法來進行抗藥抗體的評估和中和抗體的檢測。其中，步主要集中于對結(jié)合在樣品上的抗藥抗體進行檢測。在篩選出抗藥抗體并確認其特異性結(jié)合后，對抗體濃度進行評估，從而完成對抗藥抗體的定量。針對中和抗體活性的免疫原性檢測是通過細胞水平實驗或配體競爭性結(jié)合實驗完成的。

免疫原性是指能夠刺激機體免疫系統(tǒng)形成特異抗體或致敏淋巴細胞的性質(zhì)。免疫原性的評價與生物藥研發(fā)緊密相關。生物療法涉及到的蛋白質(zhì)、抗體，偶聯(lián)多肽和寡聚核苷酸能夠誘發(fā)機體產(chǎn)生有害的免疫反應，導致抗藥抗體（Anti-Drug Antibody,ADAs）的產(chǎn)生，這類抗體會潛在威脅到病人的生命安全（引起過敏，自身免疫等不良反應）。其中，具有中和能力的抗藥抗體被稱作中和抗體（Neutralizing Antibody,NAbs）。中和抗體能夠通過抑制生物藥的生物活性進而減弱其藥效。免疫原性檢測分為對抗藥抗體和中和抗體的檢測評價兩個部分。

服務類型^[6][7]

2.抗藥抗體 （Anti-Drug Antibody, ADA）檢測

免疫系統(tǒng)可能會通過產(chǎn)生抗藥抗體而對這些生物分子做出反應?？顾幙贵w會對藥物暴露、藥物毒性作用、藥物代謝動力學、藥物效應動力學等造成影響。因此，在臨床前研究和臨床研究中，開發(fā)可靠的、能夠有效評估抗藥抗體反應的實驗方法顯得尤為重要。對抗藥抗體的評估涉及多步驟的分析過程，其中包含廣泛的實驗形式以及方法學。

抗藥抗體的完整性分析評估主要包括以下幾個步驟：

1.抗藥抗體的篩選實驗：篩選實驗能夠確認樣品中抗藥抗體的存在。常見的方法包括直接或橋接酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），電化學發(fā)光（ECL）或放射免疫測定分析（RIA）。非特性背景（NSB）通常是通過檢測未處理動物在不同時間點的多組血清樣品來測定的，得到的這個NSB數(shù)據(jù)可以作為抗藥抗體檢測實驗中的一個分界點。

2.抗藥抗體驗證實驗：篩選出來的陽性樣本必須通過驗證實驗進行分析進而排除任何的假陽性結(jié)果。

3.抗藥抗體鑒定實驗：經(jīng)過確認的陽性樣本將會被進一步確認其在結(jié)合親和性、亞型及其他方面的特性。

2.中和抗體（Neutralizing Antibody, NAbs）檢測

中和抗體：宿主對抗原或病毒感染的常規(guī)反應是產(chǎn)生抗體，它與病毒結(jié)合而使其失活（中和）。中和抗體針對治療藥蛋白或多肽能夠顯著降低其藥效，因此中和抗體檢測是免疫原性檢測中是很關鍵的一個部分。

通常，美國食品藥物管理局（FDA）認為生物實驗能更加真實的反映出體內(nèi)的環(huán)境狀況。對于中和抗體的檢測，生物實驗應該與作用機理相關，否則通過實驗來對中和抗體的臨床效果進行評價將不能提供充分的信息。中和實驗的開發(fā)和驗證具有一定難度，并且在不同的樣本間存在顯著變化。

然而，細胞水平實驗由于在認識患者對藥物蛋白免疫反應的重要性上起著關鍵作用，所以仍然被推薦使用。細胞水平上的中和抗體檢測實驗涉及到細胞在受到藥物或藥物所抑制的配體刺激所引發(fā)的胞內(nèi)信號通路，或者也可能與在細胞表面所發(fā)生的胞外結(jié)合事件相關。在我們常見的細胞水平實驗中，最常用的數(shù)據(jù)讀取方法包括細胞增殖，生物標記，報告基因表達，抗體依賴的細胞介導的細胞毒素（ADCC）等實驗。

參考文獻

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