細(xì)胞培養(yǎng)是當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究與生物工程中基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn)、藥物研制與腫瘤防治等醫(yī)學(xué)實(shí)踐提供了全新的手段。細(xì)胞培養(yǎng)包括原核生物細(xì)胞，入細(xì)菌;真核單細(xì)胞生物，入酵母菌、四膜蟲(chóng)等;植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)以及于此密切相關(guān)的病毒的培養(yǎng)。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞(primary culture cell)與傳代細(xì)胞(subculture cell)。原代細(xì)胞是指機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)，適應(yīng)在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱(chēng)為傳代細(xì)胞。
分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi))就貼附在瓶壁上，這就稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。
分散呈圓球形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開(kāi)始有絲分裂，逐漸形成致密的細(xì)胞單層，稱(chēng)為單層細(xì)胞(sigle cell),這種培養(yǎng)方法稱(chēng)為單層細(xì)胞培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
如果漂浮的死細(xì)胞多，說(shuō)明細(xì)胞有很多老化的，建議每次傳代的時(shí)候，在用胰酶消化之前，用PBS將細(xì)胞漂洗一遍，胰酶消化的時(shí)間要把握好，37℃2-3min即可，及時(shí)終止反應(yīng)，否則胰酶消化過(guò)度對(duì)細(xì)胞損傷較大，也會(huì)有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動(dòng)作要輕柔。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞，不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài)：成纖維樣細(xì)胞(fibroblast like cell)與上皮樣細(xì)胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動(dòng)的游走細(xì)胞。
某些傳代細(xì)胞還可用懸浮方法培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。