T5核酸外切酶
T5核酸外切酶 性質(zhì)
T5核酸外切酶沿5’→3’方向降解DNA，它可降解雙鏈DNA、單鏈DNA和缺刻的質(zhì)粒DNA。它既能從5’-末端起始降解DNA，也能從線性或環(huán)狀雙鏈DNA的切刻或缺口處起始降解DNA，但不能降解超螺旋雙鏈DNA。T5核酸外切酶可應(yīng)用于Gibson組裝。（1）1× T5 Exo Buffer：50mM KAc，20mM Tris-Ac pH 7.9，10mM Mg(Ac)2，1mM DTT。該酶在PCR Buffer中也具有活性。 （2）該酶的最佳反應(yīng)溫度為37°C，在50°C也具有一定活性，因此可用于Gibson組裝。T5核酸外切酶純化自含T5噬菌體D15基因質(zhì)粒的E.coli菌株，是核酸外切酶的一種，該酶能沿5′→3′方向降解DNA。它既能從5′末端起始消化，也能從線性或環(huán)狀雙鏈DNA的切刻或缺口處起始消化，但不能降解超螺旋雙鏈DNA。T5核酸外切酶還具有單鏈DNA核酸內(nèi)切酶活性。這些特性使得T5核酸外切酶常被用于消化DNA和基因克隆上。