cDNA文庫構(gòu)建是將mRNA在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)質(zhì)粒載體連接后轉(zhuǎn)化受體菌，進(jìn)行繁殖擴(kuò)增。最終獲得包含組織或細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆群體。cDNA文庫構(gòu)建經(jīng)典方法是用Oligo(dT)作逆轉(zhuǎn)錄引物，或者用隨機(jī)引物，給所合成的cDNA加上適當(dāng)?shù)倪B接接頭，連接到適當(dāng)?shù)妮d體中獲得文庫。RNA的提取(例如異硫氰酸胍法，鹽酸胍—有機(jī)溶劑法，熱酚法等等，提取方法的選擇主要根據(jù)不同的樣品而定)，要構(gòu)建一個(gè)高質(zhì)量的cDNA文庫，獲得高質(zhì)量的mRNA是至關(guān)重要的，所以處理mRNA樣品時(shí)必須仔細(xì)小心。cDNA文庫在研究具體某類特定細(xì)胞中基因組的表達(dá)狀態(tài)及表達(dá)基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢，從而使它在個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應(yīng)用價(jià)值，是研究工作中最常使用到的基因文庫。