| 性狀 |
| 天（門）冬酰胺酶系由微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的酶制劑，為白色結(jié)晶性粉末，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿、乙醛、苯等到有機(jī)溶劑，微有濕性，對(duì)熱穩(wěn)定，在500C下持續(xù)15min,活力降低30%，600C下不足1h完全失活。凍干品在2～50C可穩(wěn)定數(shù)月。但其溶液只能保存數(shù)日，200C貯存7天。50C貯存14天均不減少酶的活力。最適ph為8.5，最適溫度370C。本品是一種對(duì)種瘤細(xì)胞具有選擇性抑制作用的藥物。對(duì)實(shí)體瘤和白血病均有效，且與常用的巰嘌呤、長(zhǎng)春新堿、阿糖胞苷、甲氨喋呤等無交叉耐藥現(xiàn)象。 |
| 所屬類別 |
| 生物化學(xué)品: 酶類: 治療用酶 |
| 用途與作用 |
(天）門冬酰胺酶為抗腫瘤酶制劑。對(duì)急性粒細(xì)胞型白血病和急性單核細(xì)胞白血病有一定療效。對(duì)惡性淋巴瘤療效也較好，對(duì)急性淋巴細(xì)飽白血病緩解率在50%以上，對(duì)于常用藥物治療后復(fù)發(fā)的病例也有效，但是單獨(dú)使用不僅緩解期短，且易產(chǎn)生耐藥性。對(duì)機(jī)體免疫尚有抑制作用。但是腸桿菌（天）門冬酰胺酶含內(nèi)毒素，可引起發(fā)熱、食欲減退、惡心、嘔吐、腹瀉，有的病人頭痛、頭昏、嗜睡、精神錯(cuò)亂等，有的病人有血漿蛋白低下，血脂質(zhì)過高或過低，氮質(zhì)血癥和肝功能損傷，有的病人有骨髓抑制，血小板和白細(xì)胞下降。有的病人脫發(fā)、蛋白尿、胰腺炎。用前必須先做皮試，以免引起過敏反應(yīng)，有過敏史病人應(yīng)十分小心或不用。不同藥廠、不同批號(hào)的產(chǎn)品其純度和過敏反應(yīng)均有差異，使用時(shí)要慎重。有致畸胎作用、妊娠早期禁用。肝腎功能嚴(yán)重?fù)p害者忌用。
可用于靜注、靜滴、肌注和鞘內(nèi)注射。一般劑量：20～5000U/kg,或10000～15000U/m%<2，每周3～7次。從每日500～1000U/kg，較佳。亦可每周應(yīng)用一次，每次25000U/kg.一般以3～4周為一療程.總劑量應(yīng)根據(jù)所用藥物的純度和毒性而定,靜注以生理鹽水20～40ml稀釋,靜滴以5%葡萄糖液或0.9%氯化鈉注射液500ml稀釋. |
| 合成工藝與制法 |
菌種培養(yǎng)采取大腸桿菌Escherichia Coli A.S.1.357，牛肉汁培養(yǎng)基100ml，蛋白胨1g，氯化鈉0.5g和瓊脂2～2.5g,在370C下，試管培養(yǎng)24h，茄瓶培養(yǎng)8h ,錐瓶培養(yǎng)16h。
大腸桿菌肉湯培養(yǎng)基；370C;2d→菌種培養(yǎng)肉湯菌種
種子培養(yǎng)培養(yǎng)基用10%的玉米漿接種量1%～1.5%，在370C下，通氣攪拌培養(yǎng)6～8h。
肉湯菌種玉米漿；370C;6h→種子培養(yǎng)種子菌種
發(fā)酵罐培養(yǎng)取10%玉米漿接種量8%，在370C下，通氣攪拌培養(yǎng)6～8h，離心，分離發(fā)酵液，得菌體，攪拌下加入2倍發(fā)酵液量的丙酮，壓濾，濾餅過篩，自然風(fēng)干成菌體干粉。
種子菌種玉米漿; 370C；7h→發(fā)酵罐培養(yǎng)發(fā)酵液丙酮→壓濾，風(fēng)干干菌體
提取、沉淀每千克菌體干粉加入pH8的硼酸緩沖液（0.01mol/L）10L，在攪拌下370C保溫1.5h后，降溫到300C左或，用乙酸溶液（5mol/L） 調(diào)節(jié)pH4.2～4.4,壓濾，加入2倍于濾液體積的丙酮，靜置3～4h，待沉淀完全，過濾，收集沉淀，晾干，即得干粗酶。
干菌體硼酸緩沖液；pH8;370C→提取提取液HAc;pH4.3→沉淀干粗酶
熱處理取粗制酶1g 加入20ml 甘氨酸溶液（3g/L即0.3g），調(diào)節(jié)pH8.8,攪拌1.5h，離心，收集上清液，加熱到600C，熱處理30min。離心棄去沉淀，上清液加2倍體積的丙酮，析出沉淀，離心，收集酶沉淀，加pH8磷酸緩沖液（0.01mol/L），再離心棄去不溶物，得上清酶沉液。
干粗酶甘氨酸；600;30min→熱處理酶溶液
精制、凍干調(diào)節(jié)pH8.8酶溶液，離心棄支沉淀，上清液再調(diào)pH7.7,在上清液中加聚乙二醇（500g/L即50%），使聚乙二醇的濃度達(dá)到160g/L（16%），在溫度2～50C時(shí)，放置4～5d，有沉淀析出，離心分離沉淀。加蒸餾水使之溶解，加4倍溶液量的丙酮，沉淀，同法重復(fù)1次，沉淀用pH6.4磷酸緩沖液（0.05mol/L）溶解，得精制酶溶液。調(diào)節(jié)pH至5～5.2，再加聚乙二醇（500g/L）,如此重復(fù)處理1次。再調(diào)pH7.7，加聚乙二醇（500 g/L）溶解，在無菌條件下用6號(hào)垂熔漏斗過濾，分裝，冷凍干燥，即得注射用（天）門冬酰胺酶成品，每支10000U或20000U。
酶溶液聚乙醇；不同pH處理→精制無熱原酶液
無菌分裝→凍干（天）門冬酰胺酶凍干制劑 |
| 參考質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) |
| 中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)二部第六冊(cè)（生化藥品第一分冊(cè)）13頁 | | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | | 效價(jià) | 每毫克蛋白含（天）冬酰胺酶效價(jià)≥250單位 |
|