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腺苷5'-三磷酸二鈉三水合物價(jià)格

腺苷5'-三磷酸二鈉三水合物 更多供應(yīng)商 51963-61-2 腺苷5'-三磷酸二鈉三水合物 價(jià)格

性狀
本品為白色結(jié)晶或類白色粉末，無(wú)臭，略有酸味；有引濕性。在水中易溶，在乙醇、乙醚、氯仿及苯中極微溶解。堿性溶液中較穩(wěn)定，酸性及中性溶液中易分解。受熱也易分解。
所屬類別
生物化學(xué)品: 核酸類: 核苷酸及其衍生物
用途與作用
用于心肌梗死及腦溢血時(shí)，應(yīng)在發(fā)病后2-3周開始應(yīng)用。副反應(yīng)較少；靜注宜慢。
合成工藝與制法
方法一、以免肉為原料
兔肉松的制備 將冰凍過的兔體迅速去骨后絞碎，加入3-4倍量的95%乙醇，攪拌30min后過濾，制成肉糜，再加入2-2.5倍的乙醇重復(fù)上述操作，將肉糜置于乙醇中，加熱煮沸5min，取出并迅速置于冷卻的乙醇中降溫至10℃以下，過濾并壓干，將肉餅搗碎后冷風(fēng)吹干制得兔肉松。
兔肉[絞碎]→[冰浴]肉糜[95%冷乙醇]→[30min]變性肉糜[95%乙醇]→[煮沸5min]肉餅[搗碎，吹干]→[<10℃]肉松
提取、吸附、洗脫 將肉松加入4倍量的蒸餾水，攪拌30min，過濾壓成肉餅，搗碎后再加3倍量的蒸餾水重復(fù)上述操作，將兩次的濾液合并，加入總體積4%的冰醋酸，用6mol/L鹽酸調(diào)pH為3，冰浴冷卻后過濾，濾液經(jīng)陰離子交換樹脂吸附，用pH3、0.03 mol/L氯化鈉溶液洗滌柱上滯流的AMP、ADP及無(wú)機(jī)鹽等至薄層層析檢查無(wú)AMP、ADP斑點(diǎn)而有ATP斑點(diǎn)出現(xiàn)時(shí)，再用pH 3.8、1mol/L氯化鈉液洗脫ATP，收集洗脫液，為防止ATP的水解，上述過程應(yīng)在0-10℃進(jìn)行。
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除熱原及雜質(zhì)、結(jié)晶、干燥 洗脫液用0.6%的硅藻土和0.4%的活性炭除去熱原及雜質(zhì)，然后用6mol/L鹽酸調(diào)pH為2.5-3，在28℃恒溫水浴中加 3-4倍量的95%乙醇，使ATP-二鈉鹽結(jié)晶，收集結(jié)晶，干燥，得ATP成品。
ATP洗脫液[硅薄土，活性炭]→[10min]濾液[乙醇]→[pH2.5-3, 28℃]ATP成品
方法二、光合磷酸化法
葉綠體混懸液的制備 新鮮菠菜葉7kg，用水洗凈后加入Tris緩沖液10L，攪碎后離心，即得。
新鮮菠菜葉[Tris緩沖液]→[搗碎3min，離心]葉綠體混懸液
肌激酶的制備 將乙二胺四乙酸鈉27.9g和氫氧化鈉63g加冷蒸餾水溶解后，稀釋，至37.5L。取家兔肌肉，浸入冰塊中，攪碎成肉漿，加入等體積的乙二胺四乙酸鈉-氫氧化鈉溶液，攪拌提取10min，離心，取上清液，加入總體積的0.05倍的2mol/L鹽酸，水浴加熱至90℃，保溫3min后，置冰浴中降溫至20℃，加2mol/L氫氧化鈉調(diào)pH至6.5，離心，取上清液裝瓶密封，冰箱冷凍保存。
兔肉[乙二胺四乙酸鈉，氫氧化鈉]→[10min]肌激酶
光合反應(yīng) 將磷酸氫二鈉150g用2L蒸餾水溶解后，再加入Tris50g、 AMP55g，攪拌使其溶解，加水稀釋至4L，加6mol/L鹽酸調(diào)pH至7.8-7.9。將該溶液與含ATP55g的0.308%二氮蒽甲硫酸鹽溶液50ml及肌激酶250ml的混合溶液混合，加入葉綠體混懸液中，保持pH7.9-8，開始進(jìn)行光照，光照時(shí)保持溫度為18℃左右，至反應(yīng)終點(diǎn)(約1.5h)時(shí)停止照光，稍冷卻，攪拌下加入40%三氯乙酸凝固蛋白，過濾，上清液作進(jìn)一步處理。
5'-AM[磷酸氫二鈉，Tris, 二氮蒽甲硫酸]→[10min]混合液[碘鎢燈，光照]→[pH8, 18℃]反應(yīng)液[40%三氯乙酸]→[<10℃]上清液
三磷酸腺苷二鈉的提取
汞鹽法提取 上清液攪拌下加入硝酸汞溶液500ml(重量比為硝酸汞：硝酸：蒸餾水=2.5：0.9：2的混合溶液)靜置1h，過濾，濾餅用冷蒸餾水洗滌后加1.1L蒸餾水，成細(xì)漿狀混懸液，冰浴冷卻，使溫度降至3℃以下，保持溫度不超過5℃，通入硫化氫氣體，當(dāng)溶液全部變黑時(shí)(約需25 min)，離心，上清液經(jīng)用酸處理過的濾紙漿過濾，濾液加入5mol/L的氫氧化鈉液，調(diào)pH=3.8，再加入溶液總量的千分之五的5mol/L的氯化鈉和三倍量體積的95%的乙醇，冰箱中放置過夜，收集沉淀，將沉淀中加入丙酮研磨脫水，直至全部成粉末狀，丙酮洗滌2-3次，真空干燥即得三磷酸腺苷二鈉。
上清液[硝酸，硝酸汞]→[1h]ATP汞鹽[硫化氫氣體]→[5℃，20-25min]ATP溶液[5mol/L氫氧化鈉，氯化鈉，乙醇]→[pH3.8]ATP鈉鹽[丙酮脫水]→[五氧化二磷減壓干燥]ATP成品
樹脂法提取 將上清液中加入3-4倍體積的95%乙醇，攪拌，冷卻放置4-5 h，過濾，得粗品。將粗品溶解在少量蒸餾水中，加入1/2粗品質(zhì)量的硅藻土，攪拌吸附雜質(zhì)，過濾。濾液上732H+陽(yáng)離子樹脂柱，當(dāng)流出液的pH值由6下降至1，又上升到2時(shí)，表明柱內(nèi)水已流完，即開始收集。將流出液用6mol/L的氫氧化鈉調(diào)pH=6.5-7后，上717C1-型陰離子交換樹脂柱，用25%的乙酸鋇檢查流出液，有白色沉淀出現(xiàn)時(shí)，說明吸附ATP和ADP足量，即可洗脫。先用pH2.5、0.003mol/L鹽酸溶液(含0.03mol/L氯化鈉)洗脫，電泳檢查流出液至ADP消失，260nm吸收值降至穩(wěn)定，并略有回升時(shí)，說明有ATP出現(xiàn)，停止洗脫。洗脫下的ADP溶液調(diào)pH至7，用陰離子樹脂柱濃縮回收。然后用 pH3.8、1mol/L氯化鈉溶液洗脫，至流出液不再被乙醇沉淀為止，洗脫下的ATP溶液按1：1的量加硅藻土過濾除熱原，調(diào)pH=3.8，加3-4倍體積的45%的乙醇，放置過夜。過濾，分別用無(wú)水乙醇和乙醚洗滌，脫水，真空干燥，即得ATP成品。
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方法三、氧化磷酸化法
氧化 將AMP50g用2L水溶解，如有不溶用6mol/L的氫氧化鈉調(diào)節(jié)至全溶。取磷酸氫二鉀184.8g，磷酸二氫鉀57.5g，硫酸鎂17.5g，溶于5L自來水中。將兩溶液混合，加入新鮮酵母2kg，葡萄糖175g，在30-32℃下緩慢攪拌，使其發(fā)酵，電泳法或測(cè)定無(wú)機(jī)磷方法觀察轉(zhuǎn)化情況，當(dāng)部分AMP轉(zhuǎn)化時(shí)，可提高溫度至37℃，AMP斑點(diǎn)消失時(shí)為反應(yīng)終點(diǎn)，約需4-6h。反應(yīng)液冷卻至15℃加入40%三氯乙酸500ml，并用鹽酸調(diào)pH=2，過濾，得上清液。
5'-AMP[磷酸氫二鉀，磷酸二氫鉀，硫酸鎂]→[水]混合液[啤酒酵母，葡萄糖]→[30-32℃，4-6h]反應(yīng)液[氯乙酸]→[15℃，pH2]上清液
分離、去氨 上清液加活性炭，在pH2條件下緩慢攪拌2h，使活性炭吸附ATP，傾去清液，用pH2的水洗滌活性炭后，將活性炭裝入層析柱中，用pH2的水洗至澄清，然后用體積比為氨水：水：95%的乙醇=4：6：100的混合液洗脫ATP。將洗脫液置于冰浴中，鹽酸調(diào)至pH 3.8，加3-4倍體積的95%的乙醇，在5-10℃靜置，過濾，得粗品。
上清液[活性炭]→[pH2, 2h]吸附物[氨水、水、乙醇]→[混合液]洗脫液[鹽酸、乙醇]→[pH3.8, 5-10℃, 6-8h]ATP粗品
純化 將粗品溶于1.5L蒸餾水中。加硅藻土50g，攪拌，過濾，濾液調(diào)pH 3，上717C1-型陰離子交換樹脂柱，用pH 3的0.03mol/L的氯化鈉溶液洗脫，除雜質(zhì)，然后用pH 3.8，1mol/L的氯化鈉溶液洗脫，當(dāng)洗脫液遇乙醇溶液出現(xiàn)沉淀時(shí)開始收集，得ATP洗脫液。
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精制 洗脫液加硅藻土25g攪拌15min，抽濾，濾液調(diào)pH=3.8，加3-4倍95%的乙醇，置冰箱中過夜，抽濾，丙酮和乙醚洗滌，真空干燥，即得ATP成品。
ATP洗脫液[蒸餾水，硅藻土]→[pH3.8]ATP沉淀[丙酮、乙醚脫水]→[五氧化二磷減壓干燥]ATP成品
方法四、產(chǎn)氨短桿菌直接發(fā)酵法
菌種培養(yǎng) 培養(yǎng)基組成為葡萄糖10%，硫酸鎂1%，尿素0.3%，氯化鈣0.01%，玉米漿適量，磷酸氫二鉀1%，磷酸二氫鉀1%，pH 7.2。種齡為20-24h，接種量7%-9%，pH=6.8-7.2。
產(chǎn)氨酶桿菌B1-787[斜面培養(yǎng)]→[30℃, 2-3d]菌種斜面[種子培養(yǎng)]→[30℃，2-3d]菌種培養(yǎng)液
發(fā)酵培養(yǎng) 發(fā)酵罐培養(yǎng)溫度30℃，36h，并投入腺嘌呤，加尿素，氫氧化鈉，氨，控制pH值。500L發(fā)酵罐條件：投入腺嘌呤前溫度28℃，24h前通風(fēng)量1：0.5V/(V·min)，24h后通風(fēng)量1：1V/(V·mm)，40h投入腺嘌呤0.2%， 6501(椰子油酰胺)0.15%，尿素0.3%，升溫至37℃，pH=7，得發(fā)酵液。
菌種培養(yǎng)液[發(fā)酵]→[30℃, 36h]發(fā)酵液[腺嘌呤，6501，尿素]→[37℃，通風(fēng)pH=7]發(fā)酵液
提取、精制 加熱發(fā)酵液使酶失活，調(diào)節(jié)pH=3-3.5，過濾，將濾液經(jīng)769活性炭柱吸附，用氨醇洗脫液洗脫，洗脫液經(jīng)Cl-型陰離子交換樹脂洗附后，用氯化鈉-鹽酸溶液洗脫，將冷的乙醇加入洗脫液中，使沉淀產(chǎn)生，過濾，用丙酮洗滌，真空干燥，即得ATP精品。
發(fā)酵液[熱處理]→[pH3.5,過濾]上清液[769活性炭柱]→吸附物[氨醇溶液]→[Cl-型陰離子樹脂]→吸附物[氯化鈉-鹽酸溶液]→洗脫液[冷乙醇]→ATP[丙酮、乙醚脫水]→[五氧化二磷減壓干燥]ATP成品。


腺苷5'-三磷酸二鈉三水合物價(jià)格(試劑級(jí))

更新日期產(chǎn)品編號(hào)品牌產(chǎn)品信息CAS號(hào)MDL號(hào)規(guī)格與純度包裝價(jià)格庫(kù)存信息操作
2024/11/08 65001831 腺苷-5‘-三磷酸二鈉鹽，二水
Adenosine-5‘-triphosphate disodium salt dihydrate 		1g 182元 >10 詳細(xì)
2024/04/30 BP413-25 腺苷5'-三磷酸二鈉
ATP DISODIUM 25G 		51963-61-2 25g 1655元 0 詳細(xì)
2020/09/30 BP413-25 三磷酸腺苷二鈉
ATP DISODIUM 25G 		51963-61-2 Null 25g 1224元 0 詳細(xì)
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