背景及概述[1][2]
五倍子主要成分單寧酸(TanninAcid),又稱丹寧、鞣酸或鞣質(zhì)。體外實驗表明,五倍子提取物對金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌以及傷寒桿菌、副傷寒桿菌、痢疾桿菌、炭疽桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌等均有明顯的抑菌或殺菌作用。臨床研究表明五倍子提取物佐以慶大霉素、甲硝哇能增強殺菌效果,特別對銅綠假單抱菌、厭氧菌的作用尤為顯著,五倍子提取物對羊毛樣抱子菌等真菌也有較強的抑制作用。由于五倍子提取物在抑菌方面的重要作用,五倍子提取物的制備方法成為研究的熱點。
現(xiàn)有的五倍子提取物的制備方法都是采用加水浸泡、加熱回流提取,這樣直接加熱水提的操作會導(dǎo)致部分有效成分無法提取出來,或有效成分被破壞。
應(yīng)用[3]
五倍子提取物“酸、咸、平、無毒”,作為傳統(tǒng)中藥,始載于《開寶本草》,具有斂肺降火、澀腸止瀉、固精縮尿、止汗、止血、解毒、斂瘡等多種臨床功效,在臨床被廣泛應(yīng)用。我國倍子提取物產(chǎn)量較大,分布很廣,便于大規(guī)模開發(fā)生產(chǎn)。同時倍子提取物作為傳統(tǒng)中藥積累了大量的藥物配方,給現(xiàn)代醫(yī)藥工作者提供了借鑒。目前對于對于五倍子的藥理研究主要集中在抗菌研究。
1.五倍子提取物純化生產(chǎn)釀造單寧酸:
(1)將五倍子破碎,加水投入到提取罐進行提取,料水比為五倍子∶水=1∶5.4,溫控40-50℃;
(2)將提取液轉(zhuǎn)入到提取液貯罐內(nèi),加30%食用酒精稀釋到2.5Be’;
(3)將提取液的稀釋液打入冷凍澄清罐內(nèi),在-4℃下冷凍,靜止澄清48小時;
(4)將冷凍澄清的上層液導(dǎo)入清液貯槽待用,下層液收集送沒食子酸生產(chǎn)用;
(5)將清液轉(zhuǎn)入樹脂吸附工段,與75%食用酒精配制成1Be’的上柱吸附液,樹脂采用HPO樹脂;
(6)將上柱吸附液用泵打入吸附高貯槽,控制吸附速度30L/m,通過吸附柱吸附;
(7)將被吸附地單寧酸從吸附柱上用75%食用酒精洗脫上來,吸附殘液送酒精回收塔回收;
(8)將單寧酸洗脫液送蒸發(fā)工段蒸發(fā)成1Be’的高純單寧酸濃液,送干燥干段干燥而成。
2.防治羅非魚鏈球菌病功能的飼料:
取2Kg五倍子提取物用適量乙醇溶解,與98Kg市售的廣州海維飼料有限公司8992羅非魚膨化飼料混合均勻,然后攤開飼料,使乙醇揮發(fā)完全,再用2%(質(zhì)量)的海藻酸鈉溶液均勻濕潤飼料表面,然后將飼料分散在10%(質(zhì)量)的氯化鈣溶液中,5分鐘后分離出飼料,即可直接用于投喂。
制備[2]
方法一:
步驟1、將五倍子放在潔凈的盆子里,用清水沖洗干凈,放進恒溫干燥箱中干燥30分鐘,待五倍子里面的水分完全蒸發(fā)后再拿出。將干燥的五倍子放入中藥粉碎機中,粉碎,取出五倍子粉末置于干燥潔凈的燒杯中。
步驟2、稱量25g五倍子粉末置于500mL的燒杯中,加入250mL的1mol/L的HCL,用玻璃棒攪拌混勻。放入超聲波破碎儀中,在燒杯底部放入冰塊置于燒杯壁外,關(guān)好超聲波破碎儀門。調(diào)節(jié)頻率為240W,時間5min,開始破碎。
步驟3、將濾紙平鋪在過濾器上,沾上少量水,使其緊密貼合,安裝在抽濾瓶上,連接好真空泵。將上述破碎后的液體離心后,取上清液緩慢倒入過濾器,打開真空泵,進行抽濾。棄濾渣,留五倍子提取液。
步驟4、將五倍子提取液倒入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的圓形燒瓶中,連接好真空泵,檢查每個連接部位的緊密情況。在水浴鍋中加入冷水,使冷水沒過圓形燒瓶里五倍子提取液的最高面。調(diào)節(jié)溫度為60℃,開啟真空泵,濃縮至25mL,得到五倍子濃縮液(1g/mL)。
步驟5、將五倍子濃縮液收集到50mL的燒杯中,用保鮮膜把燒杯口密封,將其放入真空冷凍干燥器中,12h后,五倍子濃縮液里的水分蒸發(fā)完成取出,得固態(tài)五倍子提取物。將固態(tài)五倍子提取物用研缽研碎后,得到五倍子提取物粉末,將其倒入到干凈的塑料封口袋中,置于干燥的環(huán)境的保存。
方法二:
取600g五倍子用6000ml 50%乙醇,回流提取3次,每次2小時,濾過,合并濾液,減壓濃縮至熱測相對密度為1.2-1.3,得到五倍子提取物干燥物76g。加入β-環(huán)糊精25g,充分混勻,真空干燥得疏松無黏性干膏。
主要參考資料
[1] 謝倩, 李繼遙, 左渝陵, & 周學(xué)東. (2005). 天然藥物五倍子提取物對致齲菌生長的影響. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志, 23(1), 82-84.
[2] 王靜, 唐榮銀, 王志良, & 劉斌. (2003). 五倍子提取物對人牙周膜成纖維細胞保護作用的實驗研究. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志, 13(5), 260-263.
[3] 李仲興, 王秀華, 時東彥, 楊敬芳, 孟曉潔, & 王鑫. (2004). 五倍子提取物對表皮葡萄球菌的抗菌作用及其掃描和透射電鏡觀察. 中國中醫(yī)藥信息雜志, 11(10), 867-869.