背景[1-7]
Rab5抗體(小鼠單抗)是用Rab5抗原對小鼠進行免疫后篩選出只產生的Rab5抗體的B淋巴細胞，再將B細胞通過細胞融合技術與骨髓瘤雜交然后篩選出只分泌Rab5抗體的雜交細胞，最后通過層析柱純化制的高純度的Rab5抗體兔單克隆抗體。
Rab5抗體(小鼠單抗)用經過適當修飾的人工合成的人Rab5的一段多肽(aa2-14)作為抗原制備而成的抗Rab5小鼠單克隆抗體?？寺√枮镽ab5-65。Rab5抗體識別的是總Rab5(total Rab5)，可以檢測內源性的Rab5。Rab5是小Rab GTPases的Ras超家族成員。
Rab5主要定位于早期內體(early endosome)，在細胞質膜上也有分布，在內吞作用早期的囊泡運輸過程中起關鍵調節(jié)作用。Rab5 GTP和Rab5 GDP之間的構像改變是內吞過程多個步驟的限速因素。Rab5與GDP結合處于非激活狀態(tài)，與GTP結合處于激活狀態(tài)。這兩種狀態(tài)之間的轉換則由GEPs(GEP/GTP exchange factors)、GDIs(GDP-dissociationi inhibitors)和GAPs(GTPase-activating proteins)所調控。
Rab通過與幾種Rab5特異性的效應蛋白相互作用而發(fā)揮其功能。這些效應蛋白在內體(endosome)的特定Rab結構域(Rab domain)和Rab5形成復合物，促進Rab5載運目標貨物(Rab5-cargo targets)在內體和質膜之間的循環(huán)利用。Rab5常被用作早期內體的分子標記(early endosome marker)。TLRs是天然免疫應答中一類高度保守的模式識別受體。
通過識別病原體相關的分子模式，TLRs活化后促進免疫細胞分泌促炎性細胞因子和Ⅰ型干擾素，從而清除病原微生物的感染。Rab5a是Rabs家族的一個主要成員，定位于質膜、早期內體和網格蛋白覆蓋的囊泡。它負責調控早期內體與胞吞泡融合，是早期胞吞途徑的一個主要限速成分。有研究發(fā)現(xiàn)，Rab5a不但參與了細胞內物質運輸和蛋白分選，還參與了信號轉導。Rab5a如何調控TLRs信號轉導尚未見報道。
應用[8][9]
Rab5抗體(小鼠單抗)可用于研究RAB5在癌癥中的表達及意義：
在RABEX5及RAB5在乳腺癌中的表達及意義實驗中檢測不同乳腺組織中的RABEX5和RAB5的mRNA和蛋白的表達情況,初步探討RABEX5和RAB5與乳腺癌的關系。
方法:采用免疫組織化學法,RT-PCR法和Western Blot法分別檢測RABEX5及RAB5 mRNA和蛋白水平在60例乳乳腺癌、15例乳腺纖維腺瘤和15例乳腺正常組織中的表達,并檢測相關臨床病理指標與RABEX5及RAB5表達的關系。結果:RABEX5和RAB5 mRNA及蛋白在乳腺癌組織中的表達高于乳腺正常組織及乳腺纖維腺瘤(P<0.05),RABEX5和RAB5 mRNA及蛋白表達成正相關(P<0.05)。在乳腺癌組織T>5cm組中的表達高于T≤2cm組和2cm<T≤5cm組(P<0.05),在腋窩淋巴結轉移陽性的乳腺癌中表達高于腋窩淋巴結轉移陰性者(P<0.05)。在各乳腺癌組織學分級的表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
在乳腺癌HER-2(+)組與HER-2(-)組間,在ER(-)組與ER(+)組間、在PR(-)組與PR(+)組間的表達差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。RABEX5與RAB5在mRNA及蛋白水平的表達均具有相關性(分別為:r=0.34,P<0.05;r=0.37,P<0.05)。結論:RABEX5與RAB5在乳腺癌中的表達明顯高于乳腺良性病變和乳腺正常組織。RABEX5與RAB5在乳腺癌中的表達具有相關性。RABEX5及RAB5在腫瘤大小T>5cm、有腋窩淋巴結轉移的乳腺癌組織中的表達明顯增強。RABEX5與RAB5可能參與了乳腺癌的侵襲和轉移。
參考文獻
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