胱硫醚-β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)定位于胞漿,由四個(gè)相同的亞基構(gòu)成同源四聚體,相對(duì)分子量為63kDa,是一種磷酸吡哆醛(PLP)依賴酶。CBS活性中心由第37位的谷氨酸(Glu)到第413位精氨酸(Arg)的多肽構(gòu)成,該序列高度保守。CBS活性中心除了具有結(jié)合同型半胱氨酸(homocystein,Hcy)和絲氨酸等底物位點(diǎn)外,還包含PLP、S-腺苷蛋氨酸和亞鐵血紅素(heme)3個(gè)配基結(jié)合位點(diǎn)。
應(yīng)用
在維生素B6的催化下,胱硫醚-β-合成酶能使絲氨酸與同型半胱氨酸(HCY)合成胱硫醚。作為影響Hcy水平的一種關(guān)鍵酶,胱硫醚-β-合成酶在Hcy轉(zhuǎn)變成胱硫醚的轉(zhuǎn)硫酸路徑中起著舉足輕重的作用。同型半胱氨酸血漿濃度的升高已被認(rèn)為血管疾病,包括腦血管疾病,冠心病和血栓形成的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。胱硫醚-β-合成酶被廣泛應(yīng)用于血液中同型半胱氨酸的檢測(cè),以預(yù)測(cè)血管類疾病的發(fā)生。
發(fā)展現(xiàn)狀
胱硫醚-β-合成酶天然狀態(tài)含量很低,分離獲得大量天然產(chǎn)物比較困難,合成多肽成本高,限制了其應(yīng)用前景。部分研究者也嘗試開發(fā)基于基因工程的胱硫醚-β-合成酶制備方法,但大多都產(chǎn)量偏低,且為包涵體表達(dá),使得實(shí)用性很差,不利于工業(yè)生產(chǎn)。因此,本領(lǐng)域尚需開發(fā)一種基于基因工程的胱硫醚-β-合成酶制備方法,提高產(chǎn)率和可溶性表達(dá)含量。