背景^[1-3]

BRAF抗體是一種非偶聯(lián)、分子量約84 kDa、小鼠來源的抗BRAF（4E1）單克隆抗體。它可以用于人、小鼠背景下的WB實(shí)驗(yàn)，且不帶標(biāo)記。該抗體是由特定的免疫原制備出來的，該免疫原是由人源BRAF(NP_004324,346 a.a.~445 a.a)部分序列重組蛋白（帶GST標(biāo)簽）作為免疫原制備的，具有良好的可溶性及部分功能，因此制備出的抗體對內(nèi)源性蛋白的識(shí)別特異性更高。

BRAF在調(diào)節(jié)MAP激酶/ERK信號(hào)通路中發(fā)揮作用，該通路影響細(xì)胞分裂、分化和分泌。此外，BRAF突變最初在黑色素瘤中發(fā)現(xiàn)，隨后在結(jié)直腸癌、甲狀腺乳頭狀癌和肺癌等多種腫瘤中檢測出BRAF突變。尤其在甲狀腺癌中，BRAF基因突變高發(fā)于乳頭狀甲狀腺癌，其中亞洲人群突變率可達(dá)80%，BRAF基因是乳頭狀甲狀腺癌非常重要的腫瘤標(biāo)志物。

BRAF抗體

對于BRAF基因突變的甲狀腺癌，可以選擇靶向藥物治療、免疫治療、手術(shù)治療等多種方式進(jìn)行治療。此外，在日常生活中，應(yīng)注意保持飲食營養(yǎng)均衡攝入，適當(dāng)進(jìn)食新鮮的蔬菜、水果、肉類等食物。

BRAF抗體作為一種科研工具，其具體使用方法和效果可能因?qū)嶒?yàn)條件、樣本來源等因素而有所差異。因此，在使用BRAF抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵循產(chǎn)品說明和相關(guān)操作規(guī)范，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

應(yīng)用^[4-5]

BRAF抗體可以用于甲狀腺乳頭狀癌中BRAF突變蛋白表達(dá)與NIS蛋白表達(dá)的相關(guān)研究

通過研究山東省青島地區(qū)PTC患者的BRAF突變蛋白(鼠類肉瘤濾過性毒菌致癌同源體B1)、鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(sodium/iodide symporter,NIS)蛋白的表達(dá)情況,探討了NIS、BRAF突變蛋白之間的關(guān)系,及其和PTC腫瘤參數(shù)之間的關(guān)系,同時(shí)分析了131I治療效果與BRAF突變蛋白、NIS蛋白及病理參數(shù)的關(guān)系,為PTC的診斷、治療、預(yù)后提供臨床指導(dǎo)意義。

方法:應(yīng)用NIS、BRAF抗體及免疫組化法檢測青島大學(xué)附屬醫(yī)院(黃島院區(qū))在2015年1月至2015年12月期間,術(shù)后的留檔蠟塊60例,包括PTC 40例、結(jié)甲20例,分別行BRAF突變蛋白及NIS蛋白的免疫組化。

BRAF抗體及NIS抗體免疫組化分析(1)分析PTC及結(jié)甲患者中NIS、BRAF突變蛋白的表達(dá);(2)分析40例PTC中NIS、BRAF突變蛋白表達(dá)情況與腫瘤參數(shù)、131I治療效果的相關(guān)性。(3)將PTC按照癌旁組織不同分為結(jié)甲組、正常組,進(jìn)一步分析兩組之間NIS、BRAF突變蛋白、131I治療效果及病理參數(shù)等的差異。

BRAF抗體及NIS抗體免疫組化結(jié)果:1.在40例PTC中,BRAF突變蛋白陽性表達(dá)33例(82.5%),在20例結(jié)甲組織中,無陽性表達(dá),經(jīng)卡方檢驗(yàn),差異有顯著意義(p<0.05);2.在40例PTC患者中NIS蛋白表達(dá)的有33例(82.5%),20例結(jié)甲組織中有18例為陽性(90%),經(jīng)卡方檢驗(yàn)差異無意義(P>0.05);3.在33例NIS蛋白表達(dá)的PTC組織中,2例(6.1%)在胞膜上,31例(93.9%)在胞質(zhì)中,18例NIS蛋白表達(dá)的結(jié)甲組織中,17例在胞膜上表達(dá),1例在胞質(zhì)中表達(dá),經(jīng)Fisher檢驗(yàn),差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001);4.在40例PTC組織中,經(jīng)spearman相關(guān)性分析,認(rèn)為BRAF、NIS具有正相關(guān)關(guān)系(r=0.596,p<0.01);5.在40例PTC組織中,經(jīng)卡方檢驗(yàn),性別間BRAF突變蛋白表達(dá)差異有意義(p=0.089);6.在40例PTC組織中,經(jīng)spearman相關(guān)分析,認(rèn)為131I治療效果與BRAF突變蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.225,p=0.028);7.PTC分組中,經(jīng)t檢驗(yàn),顯示正常組與結(jié)甲組中131I治療效果及病灶數(shù)的差異有顯著意義(P=0.025,p<0.001)。

結(jié)論:1.山東省青島地區(qū)散發(fā)PTC患者中BRAF抗體突變蛋白檢測率較高,結(jié)甲患者無陽性表達(dá)。應(yīng)用免疫組化法去檢測BRAF突變蛋白的表達(dá)情況,可以為甲狀腺結(jié)節(jié)性質(zhì)的判斷提供臨床參考價(jià)值。2.NIS轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在PTC及結(jié)甲患者中,其量及強(qiáng)度無明顯的差別。碘治療的效果可能與NIS蛋白定位有關(guān),錯(cuò)誤定位可能引起治療抵抗或失敗。3.碘治療效果可能受腫瘤旁組織影響,腫瘤旁為正常組織比結(jié)甲患者效果好。4.在常規(guī)檢查基礎(chǔ)上聯(lián)合檢測NIS、BRAF突變蛋白的表達(dá),可為PTC患者診斷、131I治療及疾病的預(yù)后提供更高的臨床參考價(jià)值。

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