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黃素腺嘌呤二核苷酸的制備方法與有關研究

2024/4/1 8:54:53 作者:風華

概述

黃素腺嘌呤二核苷酸是一種分子式為C27H33N9O15P2,分子量為785.56的有機化合物,別名活性型維生素B2,核黃素腺嘌呤二核苷酸等,由核黃素和兩個磷酸基及腺苷組成,廣泛分布在好氧生物和厭氧生物的體內。該物質一般情況下表現(xiàn)為橙黃色粉末,有吸濕性,易溶于水,能溶于吡啶和苯酚,不溶于乙醇,水溶液呈黃綠色熒光,日光下遇堿分解為核黃素。黃素腺嘌呤二核苷酸是體內核黃素的活性型,是某些氧化還原酶的輔基,廣泛參與體內多種氧化脫氫反應,含有核黃素屬于需氧脫氫酶類,在生物氧化系統(tǒng)中起傳遞氫的作用,其氧化型和還原型分別簡寫為FAD和FADH2。

黃素腺嘌呤二核苷酸.jpg

作為存在于體內的活性型核黃素,黃素腺嘌呤二核苷酸廣泛參與體內各種氧化還原反應,在生物氧化系統(tǒng)中起傳達室遞氫的作用,還涉及到預防和/或治療癌癥。將黃素腺嘌呤二核苷酸用載體包封在顆粒中,改善其吸收和分布,同時限制其破壞,特別是通過血液水解酶的破壞,藥物領域實驗顯示其有治療癌癥的潛力[1]。

綜合文獻調查,黃素腺嘌呤二核苷酸可用于皮膚粘膜疾患、神經性耳鳴、腦動脈硬化、頑固性頭痛、肝硬化、黃疸及其他肝病、眼疾、視網(wǎng)膜疾患。

電化學行為

實驗研究黃素腺嘌呤二核苷酸在熱石墨柱電極上的電化學行為,有關人員發(fā)現(xiàn)對吸附有黃素腺嘌呤二核苷酸的電極加熱同時進行循環(huán)伏安掃描,隨電極溫度升高,氧化還原峰電位負移,峰電流減小,峰形變差。采用方波伏安進行吸附溶出分析,如果只在吸附步驟對電極加熱,室溫溶出,則隨電極溫度升高,溶出峰電流顯著增加。這主要歸因于直接對電極加熱引起的強制熱對流,這種對流能提高傳質,促進吸附,增強溶出響應。5min預富集對電極加熱到72℃,檢出限可以達到1×10^-8mol/L(S/N=3),比室溫27℃時降低了一個多數(shù)量級,相應靈敏度也明顯提高[2]。

醫(yī)藥研究

為探究黃素腺嘌呤二核苷酸在自發(fā)性高血壓大鼠病理性心肌肥厚和心肌纖維化中的作用及防治機制,選取12周齡的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)及周齡匹配的Wistar大鼠為實驗材料。經尾靜脈注射黃素腺嘌呤二核苷酸(每天1μmol/kg)治療10周后,采用無創(chuàng)血壓測量儀檢測大鼠的血壓及心率;超聲心動圖和組織學方法觀察病理性心肌肥厚和心肌纖維化程度;Western blot方法檢測短鏈?;o酶A脫氫酶(SCAD),CollagenⅠ,CollagenⅢ,α-SMA的蛋白表達水平;免疫熒光單標法進一步驗證SCAD的蛋白表達水平;熒光定量PCR檢測SCAD,ANF,腦利鈉肽(BNP)以及CollagenⅠ,CollagenⅢ,α-SMA的mRNA表達水平;檢測SCAD酶活性,ATP,游離脂肪酸,BNP及活性氧含量。結果自發(fā)性高血壓大鼠經黃素腺嘌呤二核苷酸治療后,收縮壓和心率均明顯降低;病理性心肌肥厚和心肌纖維化程度得到明顯改善;心肌組織中SCAD的mRNA,蛋白表達,酶活性及ATP含量均顯著增高,游離脂肪酸和活性氧水平明顯降低(P<0.05)。也就是說,黃素腺嘌呤二核苷酸可能通過激活SCAD,改善心肌能量代謝,減少氧化應激,從而抑制自發(fā)性高血壓大鼠病理性心肌肥厚和心肌纖維化[3]。

制備方法

文獻公開了一種固定化黃素腺嘌呤二核苷酸合成酶及用于催化制備黃素腺嘌呤二核苷酸的方法,相應酶突變體E263A,體外催化合成黃素腺嘌呤二核苷酸,制備的產物黃素腺嘌呤二核苷酸濃度高,雜質少,容易純化[4]。

參考文獻

[1]迪迪?!づ寥R尼,約蘭達·斯帕達維奇亞.用于預防和/或治療癌癥的黃素腺嘌呤二核苷酸:CN201980068982.9[P].CN112955152A.

[2]吳韶華,聶法慧,林志彬,等.黃素腺嘌呤二核苷酸在熱石墨柱電極上電化學行為及吸附溶出分析[J].分析化學, 2008(9).DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2008.09.015.

[3]馬智超,秦學,廖英勤,等.黃素腺嘌呤二核苷酸通過激活SCAD抑制大鼠病理性心肌肥厚和心肌纖維化[J].中國動脈硬化雜志, 2020, 28(5):8.DOI:CNKI:SUN:KDYZ.0.2020-05-012.

[4]牛衛(wèi)寧,王晶,李恒,等.一種固定化FAD合成酶及用于催化制備黃素腺嘌呤二核苷酸的方法:CN202210475574.9[P].

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