細(xì)胞培養(yǎng)板的分類
據(jù)底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V細(xì)胞培養(yǎng)板型)。
平底的什么類型的細(xì)胞都可用,但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少,如做克隆時(shí),就用96孔平底板。另外,做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無論貼壁和懸浮細(xì)胞,一般均用平底板。至于U或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞溷合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸以刺激。因此,一般需要U型板,因細(xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內(nèi)。
V型板的用途更少,一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí),為了使效靶細(xì)胞緊密接觸,常使用V型板,但這種試驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心)如果是養(yǎng)細(xì)胞的話,通常是選用平底的,另外要特別注意材質(zhì),圓底的好像沒聽說過拿來養(yǎng)細(xì)胞。
圓底的通常是拿來做分析,化學(xué)反應(yīng),或是保存樣品用的,因?yàn)閳A底比較好將液體吸得干凈,如果用平底的就不好吸了。不過,如果你是要測(cè)吸光值的話,一定要買平底的才行。大部分細(xì)胞培養(yǎng)都用平底培養(yǎng)板,便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致,還便于MTT檢測(cè)。
圓底培養(yǎng)板主要用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn),需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇
細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等。
1、平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板區(qū)別和選擇
不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板。測(cè)吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。
U型或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸刺激,這時(shí)一般會(huì)選用U型板,因?yàn)榧?xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi)。圓底培養(yǎng)板還會(huì)用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn),需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)”等。V型板常用做細(xì)胞殺傷、免疫學(xué)血凝集實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞殺傷這種實(shí)驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心)。
2、細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別
酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),也可以用來測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè),需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液。
3、常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會(huì)影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。