背景及概述

NBC1是碳酸氫鹽載體超家族的成員之一，屬于膜整合協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。幾乎所有組織器官都表達(dá)NBC家族的某一成員。NBC1在維持細(xì)胞容積、離子轉(zhuǎn)運(yùn)、介導(dǎo)細(xì)胞遷移和調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外酸堿平衡等生理過程中發(fā)揮相應(yīng)作用。1997年，個(gè)NBC1被Romero從美西螈屬動(dòng)物腎臟首次克隆獲得，之后陸續(xù)在胰腺，心和眼等克隆得到該載體。課題組前期研究結(jié)果顯示NBC1在大鼠出生后胰腺重塑旺盛期特異高表達(dá)，而在凋亡旺盛期表達(dá)最低，提示NBC1可能參與出生后胰腺發(fā)育及胰島結(jié)構(gòu)重塑[1]。預(yù)測(cè)的NBCe1拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)示意圖見下圖。NBC抑制劑(S0859)中文名稱：2-氯-N-[[2'-[(氰基氨基)磺?；鵠[1,1'-聯(lián)苯]-4-基]甲基]-N-[(4-甲基苯基)甲基]苯甲酰胺，英文名稱：2-chloro-N-[[4-[2-(cyanosulfamoyl)phenyl]phenyl]methyl]-N-[(4-methylphenyl)methyl]benzamide，CAS號(hào)：1019331-10-2，分子式：C29H24ClN3O3S，分子量：530.037。是哺乳動(dòng)物心臟中碳酸氫鈉共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的選擇性抑制劑。S0859是一種選擇性的，高親和力的Na+/HCO3-共轉(zhuǎn)運(yùn)體(NBC)抑制劑，可逆性地抑制NBC介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)pH(pHi)恢復(fù)(Ki=1.7μM，完全抑制在30μM)。使用NBC抑制劑S0859顯著提高了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性，并增加了凋亡數(shù)量。S0859對(duì)于探索轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在心臟和其他組織中的功能作用很重要。

圖1 預(yù)測(cè)的NBCe1拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)示意圖

制備

以N-(4-甲基苯基)甲基-2-氯苯甲酰胺及碘代2'-(氰基氨基)磺酰基]-聯(lián)苯為起始原料，制備NBC抑制劑(S0859)[1]。

在2000mL三口瓶中加入150mL冰醋酸、800mL水和80mL濃硫酸，快速攪拌下，加入N-(4-甲基苯基)甲基-2-氯苯甲酰胺、碘代2'-(氰基氨基)磺酰基]-聯(lián)苯溶于50mL冰醋酸溶液。調(diào)整溶液溫度在20℃左右并劇烈攪拌的同時(shí)，滴加1．5g重鉻酸鉀的20mL水溶液，此時(shí)溶液由無色變?yōu)榫G色。加畢，繼續(xù)攪拌約10min，加入2g亞硫酸氫鈉，充分?jǐn)嚢?。過濾，得墨綠色泥狀物，將其加入冷的飽和亞硫酸氫鈉溶液中，充分?jǐn)嚢柚聊酄钗锿耆稚⒑螅訜嶂练序v，趁熱過濾，熱水洗滌，充分干燥后得淺棕色粉狀固體。將該粉末用150mL約70℃的二甲苯萃取兩次，合并萃取液，自然冷卻，析出晶體，過濾，用乙醇洗滌至洗出液不渾濁，真空干燥得NBC抑制劑(S0859)。

參考文獻(xiàn)

[1] Romero MF, Fulton CM, Boron WF. The SLC4 family of HCO 3 – transporters. Pflugers Arch 2004; 447: 495–509.