背景及概述

Rab5抗體用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人工合成的人Rab5的一段多肽(aa2-14)作為抗原制備而成的抗Rab5小鼠單克隆抗體?？寺√枮镽ab5-65。Rab5抗體識別的是總Rab5(total Rab5)，可以檢測內(nèi)源性的Rab5。Rab5是小Rab GTPases的Ras超家族成員。Rab5主要定位于早期內(nèi)體(early endosome)，在細(xì)胞質(zhì)膜上也有分布，在內(nèi)吞作用早期的囊泡運(yùn)輸過程中起關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。Rab5 GTP和Rab5 GDP之間的構(gòu)像改變是內(nèi)吞過程多個步驟的限速因素。Rab5與GDP結(jié)合處于非激活狀態(tài)，與TP結(jié)合處于激活狀態(tài)。這兩種狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)換則由GEPs(GEP/GTP exchange factors)、GDIs(GDP-dissociationi inhibitors)和GAPs(GTPase-activating proteins)所調(diào)控。Rab通過與幾種Rab5特異性的效應(yīng)蛋白相互作用而發(fā)揮其功能。這些效應(yīng)蛋白在內(nèi)體(endosome)的特定Rab結(jié)構(gòu)域(Rab domain)和Rab5形成復(fù)合物，促進(jìn)Rab5載運(yùn)目標(biāo)貨物(Rab5-cargo targets)在內(nèi)體和質(zhì)膜之間的循環(huán)利用。Rab5常被用作早期內(nèi)體的分子標(biāo)記(early endosome marker)。

使用方法

Rab5抗體使用時配套使用Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋?？贵w使用時的稀釋比例如下(實(shí)際使用時需根據(jù)抗原水平的高低作適當(dāng)調(diào)整)：

保存條件

Rab5抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

注意事項(xiàng)

在Western實(shí)驗(yàn)后，請注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進(jìn)行Western實(shí)驗(yàn)時至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。