背景[1-3]
血清瓶由低析出硼硅玻璃制造，無色透明瓶符合USP I型和ASTM E 438 I型標(biāo)準(zhǔn)A類要求。可在121℃高壓滅菌20min，按照體積可分為125ml、250ml、500ml、1L、2L。
血清瓶是用來儲存血清的容器，一般由PET材料經(jīng)注拉吹工藝加工而成。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)，按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基都可以用血清瓶來儲存。
血清瓶
天然培養(yǎng)基：
使用最普遍的天然培養(yǎng)基是血清，基本以小牛血清最普遍。血清由于含有多種細(xì)胞生長因子、促貼附因子及其多活性物質(zhì)。與合成培養(yǎng)基合用，能使細(xì)胞順利增殖生長。血清需要儲存在專門的血清瓶中，在-5℃至-20℃的環(huán)境儲存。
合成培養(yǎng)基：
合成培養(yǎng)基是根據(jù)細(xì)胞所需物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴(yán)格配制而成的，種類多、成分已知，便于對實驗條件的控制。內(nèi)含碳水化合物、氨基酸、脂類、無機鹽、維生素、微量無素和細(xì)胞生長因子等。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足，最普遍的作法是加入小牛血清。
血清瓶形狀為方形，方便抓握，耐大多數(shù)酸堿的腐蝕，脆化溫度為-70℃，在-30℃時仍具有一定韌性，是良好的包裝容器，無論是天然培養(yǎng)基還是合成培養(yǎng)基，都可以用血清瓶來儲存。
應(yīng)用[4][5]
用于人臍血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定及改良凍融法脫細(xì)胞血管支架的建立研究
探討人臍血中分離并大量培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞的可行性以及臨床應(yīng)用價值。
方法：收集蚌埠醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科足月剖腹產(chǎn)手術(shù)胎兒臍帶血，無菌條件下放置于含有50U/ml肝素的血清瓶中，放置于4°C冰盒中保存，運送至細(xì)胞培養(yǎng)室，采用密度梯度離心法來獲取臍帶血單個核細(xì)胞，將獲取的單個核細(xì)胞分成兩份，加入胎牛血清M199培養(yǎng)基（FCS-M199）及自體血清M199培養(yǎng)基（AS-M199），并分別將其接種于鋪設(shè)有人纖維連接蛋白（HFN）和未鋪設(shè)有人纖維連接蛋白的培養(yǎng)皿中（標(biāo)記為：F（0）、F（1）、A（0）、A（1））進(jìn)一步進(jìn)行體外誘導(dǎo)、分化以及擴增。
并觀察貼壁細(xì)胞在整個誘導(dǎo)分化過程中的形態(tài)學(xué)變化，結(jié)合免疫組化、免疫熒光以及流式細(xì)胞儀等相關(guān)技術(shù)從不同角度對其進(jìn)行鑒定。
研究結(jié)果：培養(yǎng)12d后，臍血單個核細(xì)胞開始出現(xiàn)貼壁。而在3d之后紡錘形狀開始出現(xiàn)，此后貼壁細(xì)胞數(shù)量逐漸增多，且逐漸變成梭形。當(dāng)培養(yǎng)至一周時，則形成周圍為梭形細(xì)胞，而在中央是圓形細(xì)胞的典型集落。而在細(xì)胞培養(yǎng)至14d時，則出現(xiàn)了互相連接的細(xì)胞簇逐漸連接并形成網(wǎng)樣結(jié)構(gòu)。與此同時，隨著培養(yǎng)時間的不斷增加，長梭形細(xì)胞也開始逐漸縮短，并呈典型鋪路石樣改變。
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)至一周之后繼續(xù)觀察，在鋪設(shè)有人纖維連接蛋白的培養(yǎng)基之內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量明顯較沒有鋪設(shè)人纖維連接蛋白的多，而在兩種不同培養(yǎng)基的細(xì)胞數(shù)量上無明顯變化。
參考文獻(xiàn)
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