背景

羧熒光素是制備水解穩(wěn)定熒光共軛物的有用試劑，也是合成其它熒光素衍生試劑的有用起始材料。它是通過苯三羧酸酐與間苯二酚和氯化鋅反應(yīng)制備的5-和6-異構(gòu)體的混合物。盡管這些同分異構(gòu)體具有幾乎相同的性質(zhì)，但當(dāng)與其他分子結(jié)合時，在共軛極性、內(nèi)部熒光猝滅以及相關(guān)羅丹明標(biāo)記試劑的情況下，已觀察到標(biāo)記特異性的差異。此外，熒光素衍生物的多步合成制備需要具有異構(gòu)體純度的起始原料，以便反應(yīng)產(chǎn)物易于純化和鑒定。雖然同分異構(gòu)體純羧熒光素在市場上可以買到毫克量，但我們知道沒有公開的方法分離這些異構(gòu)體是簡單的，不需要廣泛的色譜。

5-羧基熒光素是一個用作 pH 指示劑的高度可溶性染料。這種染料顯示出強烈的熒光和濃度依賴性。這種化合物可通過羧基和伯胺之間的相互作用標(biāo)記蛋白質(zhì)、核苷酸和多肽。它主要顯影氬激光器 488 nm 處被激發(fā)的一系列綠色熒光肽，同時也可用于制備各種小熒光分子。5-羧基熒光素是一種可用作酸堿指示劑的熒光染料，5-羧基熒光素具有極強的濃度依賴性并且可以顯示較強的熒光，可通過羧基和氨基的反應(yīng)標(biāo)記蛋白質(zhì)，核甘酸和多肽。

合成路線