【概述】

戈那瑞林(Gonadorelin)為人工合成的促性腺激素釋放激素(GnRH)的類似物，在生理化學(xué)上與內(nèi)源性的牛的下丘腦釋放因子相符。肌注之后，可發(fā)揮與純天然激素類似的效果：增加垂體前葉特定促性腺激素LH和FSH的分泌。通過提高普通的下丘腦-垂體功能，改善總體受精率，從而恢復(fù)卵泡的正常生長和成熟，主要用于奶牛卵泡囊腫的治療。用于母牛繁殖疾病的治療、母牛的繁殖管理，包括同期發(fā)情和定時(shí)輸精程序等。

【制備方法】

液相色譜法純化固相合成戈那瑞林：

1.步驟與條件 離子交換色譜:緩沖溶液A:50 mmol·L- 1醋酸鈉緩沖溶液,pH值6.0。緩沖溶液B:500 mmol·L- 1氯化鈉、50 mmol·L- 1醋酸鈉緩沖溶液,pH值6.0。流速為10 mL·min- 1。用緩沖溶液A平衡柱子使pH值為6.0;用緩沖溶液A溶解粗品,用0.45μm微孔濾膜過濾;上樣,用緩沖溶液A平衡柱子使pH值為6.0;用緩沖溶液B洗脫,檢測波長為280 nm,當(dāng)紫外吸收值上升時(shí)收集樣品,紫外吸收值不再上升時(shí)停止收集。 制備型反相高效液相色譜:流動(dòng)相A:0.1%三氟乙酸(TFA)、5%乙腈水溶液;流動(dòng)相B:0.1%三氟乙酸、80%乙腈水溶液。梯度洗脫程序:100%A10 min100%A30 min50%A。流速80 mL·min- 1。檢測波長280 nm,進(jìn)樣量500 mg。 分析型反相高效液相色譜:以0.1 mol·L- 1磷酸溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0)-乙腈(85∶ 15)為流動(dòng)相,檢測波長為220 nm,進(jìn)樣量為20μ L。

2.方法 稱取500 mg DCCI/tBoc化學(xué)合成的戈那瑞林粗品,用離子交換色譜緩沖溶液A溶解,定容至500 mL,得到1 mg·mL- 1粗品溶液,經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后供離子交換色譜用。 離子交換后的樣品不需要經(jīng)過濃縮、脫鹽處理以及調(diào)pH值,直接進(jìn)行下一步制備型反相高效液相色譜操作。用制備型反相高效液相色譜的流動(dòng)相A溶解離子交換后的樣品,經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后上樣。

【制劑特點(diǎn)及作用機(jī)理】

戈那瑞林為多肽，容易被各種蛋白酶水解，僅可以用于注射給藥，可被快速吸收，分布于各組織，其生物利用度為100%。“戈那瑞林”的急性毒性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，本品無任何副作用。“戈那瑞林”的安全性試驗(yàn)證實(shí)，給奶牛肌肉注射2500微克，連續(xù)注射3天對奶牛的生理和臨床治療無任何影響，而且對懷孕奶牛1次肌肉注射500微克促黃體生成激素釋放激素也無任何影響，對各種動(dòng)物在注射位點(diǎn)都無任何刺激作用。

“戈那瑞林”的殘留消除試驗(yàn)證實(shí)，本品極易分解，口服的生物利用度為0.04%，無殘留問題。 促黃體生成激素釋放激素對動(dòng)物機(jī)體的生理作用，并沒有種間特異性，對牛、羊、豬、兔、大鼠、魚、鳥類和靈長類均有生物學(xué)活性，天然的及合成的促黃體生成激素釋放激素都能引起促黃體激素和促卵泡釋放激素的釋放。靜脈注射、肌肉注射、皮下注射或鼻腔內(nèi)應(yīng)用都能產(chǎn)生效果，但口服無效，因?yàn)樵谖杖胙髦凹幢谎杆傧Ｆ湫Ч沙掷m(xù)1小時(shí)，在血液中半衰期不到15分鐘。促黃體生成激素釋放激素對人和各種動(dòng)物（大鼠、際鼠、金黃地鼠、雞、羊、牛、豬、猴、免等）都有效應(yīng)。一般在注射后15分鐘，血液促黃體激素就升至峰值，30分鐘后促卵泡釋放激素升至高蜂值。不論從哪種途徑給藥都有作用，但劑量因給藥方式而不同。

圖1為戈那瑞林

【應(yīng)用】　

用于母牛繁殖疾病的治療、母牛的繁殖管理，包括同期發(fā)情和定時(shí)輸精程序等。 主要應(yīng)用于我國養(yǎng)牛業(yè)臨床中及奶牛的同期發(fā)情和定時(shí)輸精等。主要用于卵巢機(jī)能靜止的奶牛，直檢卵巢體積基本正常，無發(fā)育卵泡和黃體。建議在奶牛卵巢機(jī)能靜止的臨床治療時(shí)，劑量為200微克。同期發(fā)情以及定時(shí)輸精，第1次注射促黃體生成激素釋放激素，7天后，注射0.5毫克/頭前列腺素，溶解新形成的黃體。48小時(shí)后，第2次注射的促黃體生成激素釋放激素，之后16~24小時(shí)定時(shí)人工輸精。建議該產(chǎn)品在奶牛同期發(fā)情及定時(shí)輸精應(yīng)用時(shí)，劑量為100微克。

【主要參考資料】

[1]王成瑜,梁青.國產(chǎn)促性腺激素釋放激素(戈那瑞林)的臨床應(yīng)用[J].中國計(jì)劃生育學(xué)雜志,2001(06):353-355.

[2]劉磊,李引乾,周廣輝,邱瑾麗,張東興,岑桂英,熊永潔,朱曉娟,關(guān)永娟,梁冠翔.戈那瑞林在奶牛體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010,19(04):24-27.

[3]國家三類新獸藥——戈那瑞林(生源)[J].黑龍江動(dòng)物繁殖,2011,19(02):42-43+50.

[4]徐繼艷.“戈那瑞林”的研制及臨床應(yīng)用[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問,2011(08):231.

[5]肖建國,阮振興,王林鵬,籍曉濤,桑幼敏,宋成慧,萬龍巖,宣堅(jiān)鋼.液相色譜法純化固相合成戈那瑞林[J].化學(xué)與生物工程,2010,27(09):88-91.