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疊氮津的檢測

2020/10/26 11:48:35

概述[1]

疊氮津?qū)W名2-疊氮基-4-異丙氨基-6-甲硫基-1,3,5-三嗪,為無色結(jié)晶性粉末,微溶于水。其可用作芽前除草劑。在氫氧化鈉存在下,由三聚氯氰與異丙胺,再與甲硫醇鈉,最后與疊氮鈉反應(yīng)制得。

檢測[2]

ELISA檢測撲草凈等三嗪類農(nóng)藥包括疊氮津:

1)包被:用包被緩沖液將包被抗原H2-BSA稀釋成125ng/mL,在96孔酶標(biāo)板中每孔加入100μL,37℃包被3小時(shí),用洗滌液洗滌4次;

2)加樣品:實(shí)驗(yàn)孔每孔加入50μL待測化合物溶液,對照孔加入50μL樣品稀釋液;其中,待測化合物溶液為撲草凈、撲滅通、疊氮津、仲丁通、莠去通、敵草凈、西草凈、莠滅凈溶液,分別用樣品稀釋液稀釋成濃度為1000ng/mL、500ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL、1ng/mL、0.1ng/mL,每個(gè)濃度設(shè)置三個(gè)復(fù)孔;

3)加抗體:用樣品稀釋液將制備得到的單克隆抗體稀釋成125ng/mL,每孔加入50μL,37℃孵育30min,洗板4次;

4)加酶標(biāo)二抗:用樣品稀釋液將羊抗鼠酶標(biāo)二抗IgG-HRP稀釋成400ng/mL,每孔加100μL,37℃孵育30min,洗板4次;

5)顯色:每孔加入100μL新鮮配制的TMB顯色液,避光顯色10min;

6)終止:每孔加入50μL終止液,用酶標(biāo)儀450nm處測定各孔的OD值。

以待測化合物溶液濃度為橫坐標(biāo),OD/OD0(OD值表示實(shí)驗(yàn)孔的吸光值,OD0表示對照孔的吸光值)為縱坐標(biāo),運(yùn)用OriginPro9軟件分別計(jì)算撲草凈、撲滅通、疊氮津、仲丁通、莠去通、敵草凈、西草凈、莠滅凈的IC50值,結(jié)果如表所示。

結(jié)果表明,制備的單克隆抗體能較好地識別上述八種三嗪類農(nóng)藥,并且有較高的靈敏度。

主要參考資料

[1] 簡明精細(xì)化工大辭典

[2] CN201711256952.X抗八種三嗪類農(nóng)藥的群選性單克隆抗體制備及其應(yīng)用

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