蟲草提取物性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
蟲草提取物為名貴中藥冬蟲夏草的水提或醇提物，主要活性成分為核苷類化合物和多糖，具有抗炎、抗腫瘤、提高免疫力等功效?？捎糜诿廊轁櫮w，抗皺增白，延緩衰老，健身防病等。本信息是由Chemicalbook的嚴語波編輯整理。
【基源】為麥角科植物冬蟲夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆蟲蟲草蝙蝠蛾Hepialus armori-canus Oberthür 等的幼蟲尸體的復(fù)合體。
蟲草即冬蟲夏草，冬蟲夏草為蟲體與菌座相連而成，全長9～12厘米，蟲體如三眠老蠶，長約3～6厘米，粗約0.4～0.7厘米。外表呈深黃色，粗糙，背部有多數(shù)橫皺紋，腹面有足8對，位于蟲體中部的4對明顯易見。斷面內(nèi)心充實，白色，略發(fā)黃，周邊顯深黃色。菌座自蟲體頭部生出，呈棒狀，彎曲，上部略膨大。表面灰褐色或黑褐色，長可達4～8厘米，徑約0.3厘米。折斷時內(nèi)心空虛，粉白色。臭微，味淡。以蟲體色澤黃亮、豐滿肥大、斷面黃白色、菌座短小者為佳。主產(chǎn)四川、青海、貴州、云南。以四川產(chǎn)量最大。此外，西藏、甘肅等地亦產(chǎn)。
圖1為蟲夏
1.糖醇、甾醇類 從冬蟲夏草中可以分離得到膽甾醇、D-甘露醇、蕈糖、胡蘿卜甙、D- 毗喃葡萄糖苷和谷甾醇、2，2-二羥基麥角甾醇、麥角甾醇過氧化物、麥角甾醇、膽甾醇、菜油甾醇、棕桐酸酯等。由于其中麥角甾醇在冬蟲夏草體內(nèi)的含量是相對恒定不變的，通常也把它作為冬蟲夏草質(zhì)量控制的一個重要指標。
2.多糖類 冬蟲夏草在形成及生長過程中會產(chǎn)生大量的胞外多糖，主要是由木糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖這些糖組成。
3.核苷類 在冬蟲夏草體內(nèi)檢測發(fā)現(xiàn)的核苷類主要有尿嘧啶、尿苷、次腺嘌呤、黃嘌呤、腺苷、鳥苷、肌苷蟲草素(3-脫氧腺苷)等，而其體內(nèi)的主要活性成分是蟲草素和腺苷。
4.氨基酸、多肽類 冬蟲夏草中蛋白質(zhì)的含量大約在20.06%～26.40%。利用水解冬蟲夏草中氨基酸分析測得冬蟲夏草中含有蘇氨酸、天門冬氨酸等18種氨基酸，其中8種氨基酸是人體所必需的。天然的冬蟲夏草體內(nèi)主要含有谷氨酸、色氨酸和酪氨酸。
5.無機元素類 冬蟲夏草中所含有的微量元素是十分豐富的，大約有30多種包括P、Mg、Al、Nb、Ca、Ga、Zn、K、Si、Mn、Cu、Ba、Sr、Zr、Ni、Fe、Ce、Cs、As、Be、Na、B、Pb、Li、Hg、Ti等元素，其中P和Mg的含量是最高的。有人推測認為冬蟲夏草的抗癌作用可能與其體內(nèi)所含微量元素Fe、Cu、Co、P等元素有關(guān)聯(lián)。
6.有機酸 冬蟲夏草所含的有機酸種類主要有-亞油酸、油酸、軟脂酸、硬脂酸、11-二十烯酸、9 -十八烯酸(Z) 、3 -十八烷酸、14-甲基十六酸、9-十六烯酸(Z)、十六烷酸、十五烷酸、14-甲基-十五酸。
7.維生素、多胺類物質(zhì) 冬蟲夏草所含的維生素和多胺類物質(zhì)主要有維生素C、維生素B、維生素。
8.烷烴 冬蟲夏草中的烷烴主要包括二十一烷、二十烷、十八烷、十六烷。
蟲草素(Cordycepin)：異名冬蟲夏草素。分子式C10H13N5O3，分子量251.24。針狀結(jié)晶 (乙醇、正丁醇、正丙醇或水)，mp.225℃～226℃，[α]D25-35°(水)。
甘露醇(Mannitol)：分子式C6H14O6，分子量182.17。斜方針狀結(jié)晶(乙醇)，mp.166℃～ 168℃，bp.290℃～295℃/3.5mm，[α]D25-0.49°(水)，1g約溶于5.5ml水，83ml乙醇，不溶于乙醚，可溶于吡啶、堿性水溶液，1g溶于18ml甘油。
腺嘌呤(Adenine)：異名6-氨基嘌呤。分子式C5H5N5，分子量135.14。三水合物為白色斜方針狀結(jié)晶。110℃失水，mp.360℃～365℃，220℃升華。難溶于水，溶于沸水，微溶于乙醇，不溶于乙醚和氯仿。
圖2為結(jié)構(gòu)式
1.對心血管系統(tǒng)的作用
冬蟲夏草水提液可使心率減慢，心輸出量和冠脈流量增加;蟲草及蟲草菌水提液腹腔注射，均可延長注射異丙腎上腺素后常壓缺氧小鼠的存活時間; 蟲草菌醇提取物皮下注射，可增加小鼠心肌86Rb的攝入量，增加心肌供血; 人工蟲草菌菌絲體醇提物和發(fā)酵液對甲狀腺素和去甲腎上腺素所引起的大鼠應(yīng)激性心肌梗塞也有一定的保護作用; 連續(xù)給小鼠口服蟲草粉或蟲草菌粉或皮下注射蟲草菌醇提取物，均可明顯降低血清膽固醇含量及血漿β-脂蛋白; 蟲草菌醇提液靜脈注射，可明顯延長烏頭堿所誘發(fā)大鼠心律失常的潛伏期，縮短心律失常持續(xù)時間，并減少心律失常的程度。
2.免疫增強作用
冬蟲夏草醇提物或水煎給小鼠皮下或腹腔注射或肌注，均能顯著增強單核 -巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬功能，巨噬細胞體積及胞核增大，胞漿豐富，胞漿內(nèi)顆粒、空泡、吞噬小體、溶酶體增加，血清中溶菌酶含量增加。又能拮抗考的松對巨噬細胞吞噬功能的抑制作用。用蟲草給家兔灌服能促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化，給小鼠腹腔注射使T細胞酸性酯酶活性增強，脾重及脾中核酸、蛋白質(zhì)含量增加，脾中T細胞E-玫瑰花結(jié)形成率增加; 又能拮抗強的松龍、環(huán)磷酰胺引起的脾重下降及E-玫瑰花結(jié)形成減少。蟲草或蟲草菌還能使正常、陽虛、陰虛小鼠血清免疫球蛋白G增加。
3.對內(nèi)分泌的影響
冬蟲夏草及蟲草菌水提液可使去勢幼年雄性大鼠精囊增加，顯示有雄激素樣作用; 蟲草及蟲草菌水提液給雄性小鼠灌胃，可使小鼠血漿皮質(zhì)醇含量增高; 還可增高腎上腺膽固醇含量，使腎上腺增重; 蟲草具有雄激素樣的作用，對醋酸氫化可的松所致“類陽虛” 小鼠有防治作用。
4.對腎功能的影響
臨床上把人工蟲草菌的制劑用于慢性腎炎患者，結(jié)果表明可降低腎炎蛋白尿，提高血清鋅含量，降低銅/鋅比值，使血尿明顯好轉(zhuǎn)。
5.抗炎作用
用蟲草或蟲草菌液皮下或腹腔注射，對巴豆油性或二甲苯性小鼠耳腫，對大鼠蛋清性或甲醛性足爪腫和棉球肉芽腫均有顯著的抑制作用?？寡鬃饔门c其能增強腎上腺皮質(zhì)激素的合成和分泌有關(guān)。
6.抗腫瘤作用
冬蟲夏草水、醇提取物均可抑制小鼠S180肉瘤、小鼠Lewis肺癌、小鼠mA- 737乳腺癌等腫瘤生長;菌絲對小鼠S180、S37、EcA及P388均有顯著抑制作用;蟲草及蟲草菌水提物不僅可抑制小鼠S180腫瘤生長，同時還能增強環(huán)磷酰胺的抗癌作用。
7.抗衰老作用
冬蟲夏草提取物可提高與年齡有關(guān)的酶(如SOD、GSH-Px、過氧化氫酶)活性,降低衰老小鼠的脂質(zhì)過氧化和單胺氧化酶的活性水平；冬蟲夏草提取物能增強大腦功能及D -半乳糖誘導(dǎo)的衰老小鼠的抗氧化酶的活性。冬蟲夏草的類固醇激素合成的誘導(dǎo)與抗衰老功能相關(guān)。
8.對呼吸系統(tǒng)的作用
冬蟲夏草水提取液具有顯著增強腎上腺素的分泌、松弛支氣管平滑肌、擴張支氣管、祛痰、平喘等功效，對勞咳痰血、肺結(jié)核及慢性支氣管炎等疾病具有良好的治療效果。
9.其他作用
①鎮(zhèn)靜作用；②平喘作用； ③祛癌作用；④興奮豚鼠離體回腸作用；⑤升高饑餓小鼠血糖作用；⑥抗疲勞，延長饑餓小鼠游泳時間作用；⑦對結(jié)核桿菌、肺炎球菌、鏈球菌有抑制作用；⑧能降低大腸桿菌內(nèi)毒素引起的死亡；⑨抗煙堿、抗流涎作用。
圖3為麥角甾醇提取分離
圖4為蟲草素、腺嘌呤提取分離
性狀鑒別 本品由蟲體及從其頭部長出的子座組成。蟲體形似蠶，長3～5cm，直徑0.3～0.5cm。表面土黃、深黃或黃棕色，環(huán)紋明顯，20～30個，頭部紅棕色，近頭部環(huán)紋較細。有足8對，近頭部3對，中部4對，近尾部1對。質(zhì)脆，易折斷，斷面略平坦，淡黃白色。子座細長圓柱形，長4～7cm，直徑約0.3cm，表面深棕色至棕褐色，有細縱皺紋，上部稍膨大。質(zhì)柔韌，斷面類白色。氣微腥，味微苦。以完整、色黃、蟲體豐滿、子座短粗者為佳。
顯微鑒別 橫切面 蟲體橫切面呈不規(guī)則形，四周為蟲體的軀殼，其上長有銳刺毛和長絨毛，長短不一，有的似分枝狀。軀殼內(nèi)為大量菌絲，其間有裂隙。子座橫切面的周圍由卵形至橢圓形子囊殼組成，其下半部埋于凹陷的子座內(nèi)。子囊殼內(nèi)有多數(shù)線形子囊，每個子囊內(nèi)又有數(shù)個線形子囊孢子。中央充滿菌絲，其間有裂隙。不孕部分則無子囊殼。粉末 棕褐色。①菌絲眾多，白色，細長，分枝或不分枝，密集交叉成團或斷裂成節(jié)。②蟲體組織碎片呈不規(guī)則多角形，淡黃色或黃棕色，有時隱約可見黑褐色的表皮斑紋，其上有許多菌絲。③子座柄部組織外壁呈不規(guī)則方形，長方形，由許多排列緊密的細長菌絲組成。④孢子囊殼碎片及整體或斷頭子囊殼黃色，半透明，子囊細長。⑤油滴多散在菌絲中。
理化鑒別 1.取粉末1g，用乙醚溶出雜質(zhì)后，用氯仿提取，濾過，濾液揮去氯仿，滴加冰醋酸2滴，再加醋酸酐2滴，最后加濃硫酸1～2滴，顯棕黃色→紅紫色→污綠色。
2.將上述經(jīng)氯仿提過的粉末，再用20%乙醇回流提取，并濃縮至適量。
(1)取濃縮液各1ml，分置2支試管中，一管加稀鹽酸數(shù)滴，再加碘化鉍鉀試液數(shù)滴，放置10min后，產(chǎn)生黃色絮狀沉淀。另一支試管中滴加碘-碘化鉀試液，產(chǎn)生混濁。
(2) 薄層層析： 取以上制備的樣品，吸附劑為硅膠G，用0.3mol/L硼酸制板。展開劑為正丁醇-醋酸-水(2：1：1)。展距為17cm。顯色劑： a為0.1%高碘酸鉀，b為0.5%聯(lián)苯胺醇液。將a液豨釋5倍，噴于板上，烘干后，再噴b液，則在藍色背景中呈白色斑點。
紫外光譜鑒別
冬蟲夏草及其資源品種的紫外光譜
取樣品粗粉1g，用乙醇回流提取，提取液置50ml容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，取5ml于100ml容量瓶中用乙醇定容后，于島津UV-210A型紫外分光光度計上測定其紫外光譜。結(jié)果冬蟲夏草與蔗蛾蟲草均在270nm波長處有吸收峰。
圖5為冬蟲夏草與蔗蛾蟲草的紫外光譜圖
1.冬蟲夏草 2.蔗蛾蟲草
蟲草面膜
將蟲草曬干或烘干，磨成細粉，再與淀粉（按10:500）混合均勻，過80目篩子即得蟲草面膜。
蟲草潤膚霜
將蟲草粉、聚乙烯醇、乙醇、甘油、香料與水（按0.5:10:10:3:0.05:73.75）混合均勻，即得透明狀成品。
蟲草甘油搽劑
將蟲草浸于甘油中(按2.16:98)，一周后即可使用。
蟲草養(yǎng)發(fā)精
將蟲草粉、醋酸羊毛脂、維生素B6、卵磷脂、香精按加入到乙醇中，攪拌混合均勻，靜置一周以上，過濾后即得成品。
蟲草水提液給小鼠腹腔注射的LD50為27.8g/kg，皮下注射的LD50為(38.0 ±5.1) g/kg;蟲草菌水提液腹腔注射的LD50為(17.9±1.7) g/kg，皮下注射的LD50為(17 ±1.4)g/kg;蟲草菌絲體醇提物小鼠腹腔注射的LD50為(35.2±1.2)g/kg，靜脈注射的LD50 為 (24.5±2.2) g/kg。
補肺益腎，止血化痰。用于久咳虛喘，勞咳咯血，陽痿遺精，腰膝酸痛。
蟲草提取物
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