"HCEC-B4G12 Cells(贈送Str鑒定報告)|人角膜內皮細胞

細胞背景資料：角膜；內皮細胞；SV４０轉化；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(Zui主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。

細胞生長：貼壁

SF-539 BT細胞類似產品：：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞

Roswell Park Memorial Institute 8402細胞類似產品：：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞

KBM7細胞類似產品：：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞

H-548細胞類似產品：：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞

LNCaP subline C4-2細胞類似產品：：Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞

HCEC-B4G12 Cells(贈送Str鑒定報告)|人角膜內皮細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

MESSADX5細胞類似產品：：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞

R D細胞類似產品：：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞

P388-D1細胞類似產品：：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞

LS-513細胞類似產品：：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞

Y3-Ag 1.2.3細胞類似產品：：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁

MIHA細胞類似產品：：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞

High5細胞類似產品：：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞

Pro-5 Lec1.3c細胞類似產品：：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞

253JBV細胞類似產品：：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞

McARH7777細胞類似產品：：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞類似產品：：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞

造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中Zui常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°CGAO壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不HAO，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且HAO幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求GAO，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！

正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存HAO了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇Zui合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記HAO細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以Zui快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟ZuiHAO使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做HAO記錄是非常非常重要的！還有一個Zui重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做HAO防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。

H-650細胞類似產品：：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞

HIMEC細胞類似產品：：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞

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Centre Antoine Lacassagne-27細胞類似產品：：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞

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PL12細胞類似產品：：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞

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GM07404細胞類似產品：：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞

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HCEC-B4G12 Cells(贈送Str鑒定報告)|人角膜內皮細胞

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BHT101細胞類似產品：：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞

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PBMC細胞類似產品：：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞

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Vx2細胞類似產品：：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞

BHT101細胞類似產品：：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞

UPCI:SCC090細胞類似產品：：alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞

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HCC-4006細胞類似產品：：SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞

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MGC-803細胞類似產品：：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞

HMC細胞類似產品：：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞

SNU520細胞類似產品：：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞

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T98G細胞類似產品：：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞

NCIH146細胞類似產品：：NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞

P-19細胞類似產品：：HPAF/CD18細胞、184A1細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞

H647ell細胞類似產品：：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞

BEL-7402細胞類似產品：：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞

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Calu6細胞類似產品：：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞

SHG 44細胞類似產品：：HD-LM-2細胞、Hs840T細胞、RT4-D6P2T細胞

Pt K1 (NBL-3)細胞類似產品：：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞

G 401細胞類似產品：：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞

MDA330細胞類似產品：：Pt K2細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞、ROS-17/2.8細胞

BJAB-1細胞類似產品：：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞

GM02132細胞類似產品：：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞

H19-7細胞類似產品：：GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞

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H2291細胞類似產品：：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞

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HEY A8細胞類似產品：：ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞

MCF-7B細胞類似產品：：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞

293E細胞類似產品：：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞

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