"NCTC 1469 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠正常肝細胞

細胞背景資料：１９５２年建系，源于正常C３H/An小鼠的肝臟組織，表達H-２K抗原,鼠痘病毒陰性。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

801-D細胞類似產品：：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞

DF1細胞類似產品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞

COV 434細胞類似產品：：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞

RMa-bm細胞類似產品：：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞

SW-1116細胞類似產品：：CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞

NCTC 1469 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠正常肝細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步沒有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數生長期的狀態(tài)，在對數生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經步觀察發(fā)現細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

Hs675T細胞類似產品：：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞

NCIH2228細胞類似產品：：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞

Line 870 Emory University-4細胞類似產品：：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞

ECC 12細胞類似產品：：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞

SU-DHL1細胞類似產品：：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCTC 1469 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠正常肝細胞

細胞生長特性：貼壁

RCCJF細胞類似產品：：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞

HPB-ALL細胞類似產品：：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞

NALM-6細胞類似產品：：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞

P3-X63.Ag8.653細胞類似產品：：MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞

SHI1細胞類似產品：：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞

C127細胞類似產品：：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞

細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)；４)將裝HAO細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數/１００個細胞。一般細胞分裂指數介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO時期，稱指數增生期(對數生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋HAO瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。

CT26細胞類似產品：：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞

7860細胞類似產品：：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞

Madison lung細胞類似產品：：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞

RPTC細胞類似產品：：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞

BCaP-37細胞類似產品：：HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞

T-ALL-1細胞類似產品：：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞

Panc 2.03細胞類似產品：：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞

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ST2細胞類似產品：：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞

BHP 10-3細胞類似產品：：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞

Kit225 K6細胞類似產品：：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞

SW-527細胞類似產品：：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞

ONS-76細胞類似產品：：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞

C32 [Human melanoma]細胞類似產品：：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞

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CMEC/D3細胞類似產品：：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞

OCI/AML-3細胞類似產品：：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

HLE B-3細胞類似產品：：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Ly1細胞、CZ-1細胞

T/G HA VSMC細胞類似產品：：10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞

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MDA-MB-435-S細胞類似產品：：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞

NCTC 1469 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠正常肝細胞

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H747細胞類似產品：：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞

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mREC細胞類似產品：：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞

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B16F0細胞類似產品：：HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞

MFC細胞類似產品：：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞

KYSE 70細胞類似產品：：REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞

TCCPAN2細胞類似產品：：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞

SHEE細胞類似產品：：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞

143B TK-細胞類似產品：：GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞

GDM1細胞類似產品：：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞

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MM6細胞類似產品：：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞

High Five細胞類似產品：：KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞

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OSC19細胞類似產品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

Ha Fe細胞類似產品：：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞

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1.1B4細胞類似產品：：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞

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MDA-MB-435細胞類似產品：：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞

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SU86.86細胞類似產品：：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞

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NCI-H250細胞類似產品：：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞

MGc80-3細胞類似產品：：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞

BNL.1ME A.7R.1細胞類似產品：：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞

mousepodocyte細胞類似產品：：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞

L-5178-Y-R細胞類似產品：：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞

373 MG細胞類似產品：：OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞

CCD-966SK細胞類似產品：：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞

DOK細胞類似產品：：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞

Med 283細胞類似產品：：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞

H-2030細胞類似產品：：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞

BC-PAP細胞類似產品：：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞

C2-C12細胞類似產品：：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞

TE354.T細胞類似產品：：S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞

87 MG細胞類似產品：：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞

NCI-H841細胞類似產品：：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞

SKUT-1細胞類似產品：：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞

HCC78細胞類似產品：：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞

CCD19-Lu細胞類似產品：：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞

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PC 61 5.3細胞類似產品：：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞

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SKES-1細胞類似產品：：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞

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NCTC 1469 Cells(贈送Str鑒定報告)|小鼠正常肝細胞

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