"TE-10 Cells(贈送Str鑒定報告)|人食管癌細胞
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
接收細胞相關問題:如不能在收到細胞后及時操作細胞,T25及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在37度過夜,血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置1-2天(注意不要放冰箱),干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升華,請即刻復蘇細胞。T25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境,同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁,此步驟非常必要。T25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞,可以收集上清后離心(1200rpm,5min)后,將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中,由于不斷震蕩及環(huán)境不適,可能導致細胞破碎死亡,從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下,平衡后,貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可;懸浮細胞可以離心(1000rpm,3min)收集細胞,并用PBS重懸后再離心一次,再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞生長:貼壁
H157細胞類似產品::CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
DMS-53細胞類似產品::HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
MDA-MB 453細胞類似產品::LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
U251細胞類似產品::Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
FET細胞類似產品::CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
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細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
MT-3 [Human leukocytes]細胞類似產品::PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
C17細胞類似產品::MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
Hi-5細胞類似產品::HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
LC1sq細胞類似產品::Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
PNT1/A細胞類似產品::HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁生長
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T/G HA-VSMC細胞類似產品::OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但ZuiHAO為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天ZuiHAO換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做HAO防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇ZuiHAO用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力ZuiHAO時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋HAO瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。
OVMANA細胞類似產品::SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
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X63-AG 8.653細胞類似產品::LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
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關鍵字: TE-10 Cells(贈送Str鑒定報;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。