"NCI-H1341 Cells(贈送Str鑒定報告)|人小細胞肺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。

細胞生長：貼壁

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NCI-H1341 Cells(贈送Str鑒定報告)|人小細胞肺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中的“六要”“三不要”“三勤”：有的人認為細胞培養(yǎng)很難，經常一不留神就把細胞污染了，牢記細胞培養(yǎng)中的六“要”三“不要”三“勤”讓你成功培養(yǎng)出你想要的細胞！六“要”：1、拿到新細胞的時候要做HAO支原體檢測，不管是買的細胞、惠贈的細胞，并迅速擴增凍存。2、離開細胞房的時候要給細胞房照紫外，超凈臺要用完就開紫外。3、離開過操作臺的東西再進入操作臺之前一定要用酒精噴一遍，包括一切實驗耗材、儀器、以及你帶著手套的手。4、培養(yǎng)基的話Zui多不要超過2天就要換一次。細胞可以不傳代，但是培養(yǎng)基是一定要換的。5、發(fā)現有污染要迅速處理掉，別是同時養(yǎng)了很多種細胞; 細菌污染、真菌污染很容易發(fā)現（這兩種污染絕對是環(huán)境中帶來的，多注意一下衛(wèi)生條件是可以杜絕的），支原體污染的話，細胞會長的慢，若是珍貴的細胞可以買個支原體清除劑殺一殺，還是可以挽救的。6、凍存細胞復蘇后第二天要更換一次培養(yǎng)基。三“不要”：1、不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套。2、不要怕浪費，槍頭什么的只要有可能污染就換，如果用酒精燈就什么都稍微烤一下。3、身體的各個部分不要接觸不需要接觸的地方。比如實驗臺，又比如培養(yǎng)箱內部。三“勤”：1、勤換水，水浴鍋很臟，細胞培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話，盤里的水也會很臟。那種公用的水浴鍋、培養(yǎng)箱，定期換水習慣不HAO的，交叉污染嚴重的，那就可以選擇一些綠色、安全、無刺激性的除菌劑，改善一下，免得細胞遇到污染時措手不及。2、勤擦洗，培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用安全除菌劑擦洗一次，有人用酒精擦洗，但畢竟究竟只能除掉細菌，對于真菌是沒有辦法殺死的，所以這里推薦大家選用效果和口碑都不錯的除菌劑處理。3、勤清潔，細胞房日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸。養(yǎng)細胞就像打仗，知彼知己，百戰(zhàn)不殆。做到以上幾點，細胞培養(yǎng)易如反掌，導師再也不用擔心我的細胞養(yǎng)死了。

細胞傳代方法：３-４天換液１次。

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細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI-H1341 Cells(贈送Str鑒定報告)|人小細胞肺癌細胞

細胞生長特性：懸浮生長

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造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中Zui常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°CGAO壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不HAO，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且HAO幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求GAO，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！

貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較GAO的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不HAO，有證據嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很HAO并且不損失細胞！

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