"2BS Cell|人胚肺成纖維細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚肺；成纖維細(xì)胞；女性

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞Zui大的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個(gè)人衛(wèi)生。

細(xì)胞生長：貼壁

T47D:A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞

DH82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IM-95細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞

CHO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MT-2細(xì)胞、T98細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞

OVHM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV-522細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞

H2081細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-CO-1細(xì)胞、SEM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

2BS Cell|人胚肺成纖維細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

Raji細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞

HNE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞

HeLaS3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞

2V6.11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Raji細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞

HNE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞

HeLaS3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞

2V6.11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SF 763細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞

NCI-H1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞

T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞

MDA-MB 453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞

A704細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞

NCM460細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞

HAPI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞

C-Lu65細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞

H1672細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞

HPAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞

2BS Cell|人胚肺成纖維細(xì)胞

A-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞

L-6 myoblast細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞

DHL-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-1細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞

C12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞

CHL/IU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞

MV 4;11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞

MV 4;11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞

STTG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞

H9c2(2-1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞

DU145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞

SUDHL5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞

RS4-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞

M059J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞

OE-33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MEC1細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞

PC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞

C-33 A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ST2細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞、VP 229細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

NCTC-1469細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞

INS1-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞

SKNF1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HAC-84細(xì)胞、SNU638細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞

ACC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞

H1694細(xì)胞類似產(chǎn)品：：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞

TALL 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞

INS-1E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞

JROECL19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞

VP229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞

WM266細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KE-39細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞

MPC-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞

SK-MEL-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBZY-1細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞

2BS Cell|人胚肺成纖維細(xì)胞

HaCaT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞

NCI-H1666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞

OCI-AML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞

118 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞

hESC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞

NCIH2066細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞

NCIH211細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞

BHP-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞

SK-ES1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞

hRPTC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞

SNU-398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞

DMS-79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞

2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞

CF-PAC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞

NCI-H1373細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLMVEC細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞

GM637A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO-8910 PM細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞

NPA87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DU 145細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞

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