"RFL-6 Cell|大鼠成纖維細胞

細胞背景資料：胚肺；成纖維細胞；SD大鼠

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大?。阂话憬鉀Q方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提GAO未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。

細胞生長：貼壁

IR983F細胞類似產(chǎn)品：：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞

OCI AML3細胞類似產(chǎn)品：：SW 839細胞、MC9細胞、MDAMB134VI細胞

A375mel細胞類似產(chǎn)品：：SKLMS-1細胞、Hep-G2細胞、S16細胞

H4IIEC3細胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、Capan 1細胞、HEC-1-B細胞

MC-4細胞類似產(chǎn)品：：EL4細胞、OCI/AML-2細胞、EOC 20細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

RFL-6 Cell|大鼠成纖維細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細胞以后(比如傳代HAO/分HAO細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。

TO 175.T細胞類似產(chǎn)品：：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細胞類似產(chǎn)品：：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞

MNNG細胞類似產(chǎn)品：：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

TO 175.T細胞類似產(chǎn)品：：RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞

Fetal Bovine Heart Endothelial細胞類似產(chǎn)品：：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞類似產(chǎn)品：：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞

MNNG細胞類似產(chǎn)品：：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

H-1734細胞類似產(chǎn)品：：JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞

KM-H2細胞類似產(chǎn)品：：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞

IGROV-1細胞類似產(chǎn)品：：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞

HUASMC細胞類似產(chǎn)品：：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞

TR-146細胞類似產(chǎn)品：：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞

KP 4細胞類似產(chǎn)品：：Saos2細胞、D341Med細胞、CCD 19Lu細胞

GA-10 clone 4細胞類似產(chǎn)品：：P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞

H-716細胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞

VMRC-LCD細胞類似產(chǎn)品：：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞

Hs683T細胞類似產(chǎn)品：：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞

RFL-6 Cell|大鼠成纖維細胞

HS-294T細胞類似產(chǎn)品：：HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞

BrCL18細胞類似產(chǎn)品：：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞

CHG5細胞類似產(chǎn)品：：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞

SU-DHL-16細胞類似產(chǎn)品：：RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞

PFSK細胞類似產(chǎn)品：：NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞

SW 480細胞類似產(chǎn)品：：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞

STTG1細胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞

H1703細胞類似產(chǎn)品：：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞

MTC-TT細胞類似產(chǎn)品：：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞

A 253細胞類似產(chǎn)品：：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞

HCC-1937細胞類似產(chǎn)品：：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞

SNT8細胞類似產(chǎn)品：：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞

SCC-9細胞類似產(chǎn)品：：Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞

SK LU 1細胞類似產(chǎn)品：：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞

NCI-H345細胞類似產(chǎn)品：：MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞

NCIH128細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞

TE8細胞類似產(chǎn)品：：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞

NPC-TW039細胞類似產(chǎn)品：：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞

NCIH2141細胞類似產(chǎn)品：：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞

OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞

NCIH838細胞類似產(chǎn)品：：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞

SW620細胞類似產(chǎn)品：：Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞

HT-3細胞類似產(chǎn)品：：TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞

OCI-AML-2細胞類似產(chǎn)品：：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞

H-1299細胞類似產(chǎn)品：：T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞

E6-1細胞類似產(chǎn)品：：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞

V79細胞類似產(chǎn)品：：MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞

U-266 AR1細胞類似產(chǎn)品：：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞

KMB17細胞類似產(chǎn)品：：Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞

RFL-6 Cell|大鼠成纖維細胞

KYSE 520細胞類似產(chǎn)品：：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞

MCF-7/ADR細胞類似產(chǎn)品：：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞

UMUC-3細胞類似產(chǎn)品：：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞

SKNBE(2)細胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞

HCT.116細胞類似產(chǎn)品：：SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞

H841細胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞

P388.D1細胞類似產(chǎn)品：：SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞

SN12PM6細胞類似產(chǎn)品：：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞

HONE-1細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞

D341MD細胞類似產(chǎn)品：：SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞

CWR22Rv1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞

YH-13細胞類似產(chǎn)品：：HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞

MDA-MB-435 S細胞類似產(chǎn)品：：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞

SNU484細胞類似產(chǎn)品：：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞

SBC-5細胞類似產(chǎn)品：：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞

EBTr細胞類似產(chǎn)品：：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞

LA-N-6(OAN)細胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

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