"PT-K75 Cell|豬鼻甲黏膜成纖維細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(Zui主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。

細胞生長：貼壁

SKO007細胞類似產品：：L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞

V 79-4細胞類似產品：：FHs 74 Int細胞、RA 1細胞、MFM-223細胞

Pfeiffer細胞類似產品：：L-Wnt-3A細胞、Melan-a細胞、HT clone H9細胞

Ramos細胞類似產品：：CAL51細胞、LLC PK1細胞、NCI-SNU-182細胞

3T3(A31)細胞類似產品：：COLO 824細胞、NCIH740細胞、ME 180細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

PT-K75 Cell|豬鼻甲黏膜成纖維細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

H-1666細胞類似產品：：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞

SL1細胞類似產品：：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞

MCF7細胞類似產品：：CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞

BGC823細胞類似產品：：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

細胞系永生化原理介紹：多數正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數腫瘤的細胞，可以產生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現危相，多數細胞在這個階段死亡了，但少數細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

JM-1細胞類似產品：：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞

8305-C細胞類似產品：：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞

PK-13細胞類似產品：：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞

B16 F1細胞類似產品：：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞

FHC細胞類似產品：：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞

KP-2細胞類似產品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

JVM3細胞類似產品：：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞

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Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞類似產品：：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞

COLO 741細胞類似產品：：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞

PT-K75 Cell|豬鼻甲黏膜成纖維細胞

210RCY3-Ag1.2.3細胞類似產品：：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞

Tn5 B1-4細胞類似產品：：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞

Mc Ardle 7777細胞類似產品：：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞

MDA-MB-134細胞類似產品：：OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞

C33細胞類似產品：：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞

FBHE細胞類似產品：：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞

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Karpas 422細胞類似產品：：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞

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UT-7細胞類似產品：：HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞

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PG-4 S+L-細胞類似產品：：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞

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PT-K75 Cell|豬鼻甲黏膜成纖維細胞

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SUM-190細胞類似產品：：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞

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Karpas 422細胞類似產品：：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞

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