"EJ-1 Cell|人膀胱癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在GAO壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。

細胞生長：貼壁

NCIH929細胞類似產(chǎn)品：：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞

OVCA5細胞類似產(chǎn)品：：PANC-10-05細胞、AR4-2J細胞、A-704細胞

NBL-3細胞類似產(chǎn)品：：RL952細胞、C4-1細胞、HCC0044細胞

L-02細胞類似產(chǎn)品：：H4IIE細胞、NALM6細胞、CCRF-CEM C1細胞

CCRF-CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：TB1 Lu細胞、WI 38細胞、CCD 841 CoN細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

EJ-1 Cell|人膀胱癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

NOZ細胞類似產(chǎn)品：：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞

MFC細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞

KU-812-F細胞類似產(chǎn)品：：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞

CAOV4細胞類似產(chǎn)品：：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NOZ細胞類似產(chǎn)品：：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞

MFC細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞

KU-812-F細胞類似產(chǎn)品：：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞

CAOV4細胞類似產(chǎn)品：：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

H1184細胞類似產(chǎn)品：：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞

SNU-869細胞類似產(chǎn)品：：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞

PA-TU S細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞

P3X63Ag8細胞類似產(chǎn)品：：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞

SK.MEL.28細胞類似產(chǎn)品：：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞

CAMA1細胞類似產(chǎn)品：：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞

A-10細胞類似產(chǎn)品：：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞

NCI-H498細胞類似產(chǎn)品：：RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞

A-20細胞類似產(chǎn)品：：EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞

COV-362細胞類似產(chǎn)品：：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞

EJ-1 Cell|人膀胱癌細胞

N87細胞類似產(chǎn)品：：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞

MES13細胞類似產(chǎn)品：：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞

PM6細胞類似產(chǎn)品：：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞

ChaGo K-1細胞類似產(chǎn)品：：UCH1細胞、HIT clone T15細胞、KYSE 510細胞

CT-26 WT細胞類似產(chǎn)品：：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞

Panc 08.13細胞類似產(chǎn)品：：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞

Panc 08.13細胞類似產(chǎn)品：：AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞

LICR-LON-HN6-R細胞類似產(chǎn)品：：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞

Tn5 B1-4細胞類似產(chǎn)品：：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞

OCI/AML-2細胞類似產(chǎn)品：：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞

L5178Y TK+/-3.7.2c細胞類似產(chǎn)品：：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞

SNU407細胞類似產(chǎn)品：：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞

NCI-H69C細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞

Caco-2BBe細胞類似產(chǎn)品：：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞

CORL279細胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞

J-82細胞類似產(chǎn)品：：293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞

VMRC-LCD細胞類似產(chǎn)品：：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞

JIII細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞

FET細胞類似產(chǎn)品：：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞

NCI-1155細胞類似產(chǎn)品：：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞

Sp2/0-Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞

CCLP-1細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞

3T3-L1 ad細胞類似產(chǎn)品：：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞

QGY細胞類似產(chǎn)品：：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞

RCC_7860細胞類似產(chǎn)品：：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞

IBMF-7細胞類似產(chǎn)品：：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞

MDA361細胞類似產(chǎn)品：：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞

RD細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞

MPP89細胞類似產(chǎn)品：：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞

EJ-1 Cell|人膀胱癌細胞

293/EBNA-1細胞類似產(chǎn)品：：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞

PC14細胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞

SGC 7901細胞類似產(chǎn)品：：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞

HuNS1細胞類似產(chǎn)品：：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞

184A1細胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞

SK Mel 1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞

WM115細胞類似產(chǎn)品：：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞

HCE細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞

HCE細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞

MSB1細胞類似產(chǎn)品：：LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞

U138-MG細胞類似產(chǎn)品：：HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞

SU4細胞類似產(chǎn)品：：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞

KP-N-RT細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞

H-2198細胞類似產(chǎn)品：：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞

Huh-7.5細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞

Huh7.5.1細胞類似產(chǎn)品：：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞

NCI-H2135細胞類似產(chǎn)品：：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞

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