"U-87MG ATCC Cell|人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞生長：貼壁

293H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞

IMR32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu686細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、CP-70細(xì)胞

PFSK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DC 2.4細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞

Hs 683.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TPC1細(xì)胞、H2342細(xì)胞、GAK細(xì)胞

Hu-P-T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

U-87MG ATCC Cell|人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

P31FUJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞

SCC4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞

JIMT1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞

TE-85細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

P31FUJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞

SCC4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞

JIMT1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞

TE-85細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

MADB 106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT FET細(xì)胞、KMS18細(xì)胞、KMS18細(xì)胞

NCI-H87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞

Lec1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞

L-6TG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞

786-0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞

NCI-H1563細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞

PANC0203細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞

HS-766-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞

SK MES 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞

SCC7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞

U-87MG ATCC Cell|人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

CCC-HEH-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞

HemECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞

H2141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞

HFL-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞

SPCA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-688A-T細(xì)胞、BC-020細(xì)胞、CAL62細(xì)胞

CCD841CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞

6-T CEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞

H2172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞

MC-3T3-E1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞

BJA-B1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Me Wo細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、TR146細(xì)胞

MDA-MB-361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞

U87 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞

UT-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCCC-9810細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞、FL62891細(xì)胞

UMNSAH/DF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞

T/G HA VSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞

HRVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞

HCCC9810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞

Melan-a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞

Clone Y-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-Lu65細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞

CCC-HSF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞

Bowes melanoma cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞

HNEpC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-77細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、C4-I細(xì)胞

NBL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞

T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞

Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞

NMCG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞

BEP2D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞

C38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞

BrCL18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞

U-87MG ATCC Cell|人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

U266S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞

U373 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞

SU.86細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCam-2細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞

B16BL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞

MES13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞

MES13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞

K1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞

LA-N-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞

Leydig細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞

Colo16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞

SuDHL 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞

RC92A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞

JB-6 Cl 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞

SHG 44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞

Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞

MGSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞

SW 579細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞

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