"NCI-H865 Cell|人肺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在GAO壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。

細胞生長：貼壁

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MDA-436細胞類似產品：：U266 Bl細胞、SNU-449細胞、HeLa S 3細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H865 Cell|人肺癌細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步沒有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

J 774A.1細胞類似產品：：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞

NB-4細胞類似產品：：NCI-HUT-125細胞、HCC-1438細胞、HT clone H9細胞

TK.10細胞類似產品：：HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞

IR 983F細胞類似產品：：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系（cell line）指原代細胞培養(yǎng)物經首次傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。（由此便引申出了后來的有限細胞系（FiniteCellLine）、無限細胞系（InfiniteCellLine）），因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細胞庫；美國已有美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細胞庫（HGMR）、細胞衰老細胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界大的細胞庫。細胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，別是反復傳代的細胞，常需做如下說明：組織來源：細胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。細胞生物學檢測：了解細胞一般和殊的生物學性狀，如細胞一般形態(tài)，異結構，細胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法；應說明細胞系（或株）適應的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

SCC 9細胞類似產品：：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞

U373-MG細胞類似產品：：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞

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NCI-H865 Cell|人肺癌細胞

HOP92細胞類似產品：：MCF.7細胞、OCI-Ly03細胞、KYSE-270細胞

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H-460細胞類似產品：：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞

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