"NCI-H64 Cell|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

LN 382細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞

SUDHL5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：T98-G細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞

LS-174細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OLN-93細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞

COS1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Pa14C細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、BMDC細(xì)胞

CEMx721.174.T2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1869細(xì)胞、SLK細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

NCI-H64 Cell|人肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀(guān)察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀(guān)察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀(guān)察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀(guān)察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

Hela-Ap-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞

Det. 562細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞

MM6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞

SW-1573細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Hela-Ap-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞

Det. 562細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞

MM6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞

SW-1573細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞，稱(chēng)之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱(chēng)之為有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）；已獲無(wú)限繁殖能力的細(xì)胞系，稱(chēng)連續(xù)或無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）。無(wú)限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，可能成為惡性細(xì)胞，因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系有永生性（不死性），但仍保留接觸抑制和無(wú)異體接種致死；有的有永生性，異體接種有致瘤性，說(shuō)明已惡性化。由某一細(xì)胞系分離出來(lái)的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系，稱(chēng)亞系（Subline）。這是現(xiàn)有細(xì)胞系中多的一類(lèi)，中國(guó)已建細(xì)胞系主要為這類(lèi)細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類(lèi)上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。對(duì)已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱(chēng)；細(xì)胞的命名無(wú)嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定，大多采用有一定意義縮寫(xiě)字或代號(hào)表示。但不論什么形式，均不宜太長(zhǎng)，以便記憶和了解。

RCK8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞

KOSC2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TALL-104細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞

KM12-SM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：143B TK-細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、HLFa細(xì)胞

MV 3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞

Kit225 K6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：2780細(xì)胞、PA12細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞

OCI-Ly19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞

5637細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞

HCC-1588細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞

KP 4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞

HT-29細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS578細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞

NCI-H64 Cell|人肺癌細(xì)胞

LLCPK1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞

SK-NSH細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COV-362細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞、C4-1細(xì)胞

CEMx721.174.T2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞

CHO-Lec1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞

HEK 293 EBNA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞

WM239細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM03320D細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞、TU 686細(xì)胞

FAK+/+細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞

CFPAC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞

ZR75-30細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞

Hs-600-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞

SKN-AS細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞

AZ521細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞

A-375SM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞

H-1184細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MES23.5細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞

CEM-C7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞

MIMVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞

H-1092細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞

TE 85.T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞

CoC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞

HT-22細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞

NCI-H-295細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞

H-9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞

293/EBNA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞

L78細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞

H4-II-E細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞

SKUT1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞

NCIH292細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS 683T細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞、BRL細(xì)胞

HepG2-luc細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞

NCI-H64 Cell|人肺癌細(xì)胞

H1666_DA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞

U-hth74細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞

MBT-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞

NUGC2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞

Hs 746.T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞

SK-Mel1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞

HMrSV5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞

RC13細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞

GBCSD細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞

Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞

RSC-364細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞

149 PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞

D341細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞

P3X63-Ag8.653細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞

NCI-SNU-387細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞

CORL279細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞

RPMI-6666細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞

"