"HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

RM-1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞

SW-1116細胞類似產(chǎn)品：：CL1細胞、NCIH2066細胞、CF Pac1細胞

NPC-TW-039細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細胞、NCI.H23細胞、HCC1833細胞

Okayama University Medical School-23細胞類似產(chǎn)品：：OC-316細胞、C 6細胞、L6565細胞

HUVEC細胞類似產(chǎn)品：：Rat Fetal Lung-6細胞、C-4 I細胞、T241細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細胞以后(比如傳代HAO/分HAO細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。

NCI-SNU-886細胞類似產(chǎn)品：：SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞

EFM192C細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞

NPC-TW-039細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI-SNU-886細胞類似產(chǎn)品：：SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞

EFM192C細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞

NPC-TW-039細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

HCC0015細胞類似產(chǎn)品：：COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞

IPEC-J2細胞類似產(chǎn)品：：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞

HT-29/CX-1細胞類似產(chǎn)品：：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞

MCF-7B細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞

D-341細胞類似產(chǎn)品：：NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞

NGEC細胞類似產(chǎn)品：：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞

22Rv1細胞類似產(chǎn)品：：MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞

TPC1細胞類似產(chǎn)品：：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞

GLC-82細胞類似產(chǎn)品：：C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞

H7721細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞

HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細胞

HG2855細胞類似產(chǎn)品：：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞

Vero 76 clone E-6細胞類似產(chǎn)品：：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞

P19細胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞

GA-10 (Clone 4)細胞類似產(chǎn)品：：JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞

SK-RC 52細胞類似產(chǎn)品：：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞

NCI-H2347細胞類似產(chǎn)品：：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞

NCI-H2347細胞類似產(chǎn)品：：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞

EFO27細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞

SF 126細胞類似產(chǎn)品：：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞

GM03569D細胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞

JM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞

NCIH1581細胞類似產(chǎn)品：：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞

U373細胞類似產(chǎn)品：：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞

Giant Cell Tumor細胞類似產(chǎn)品：：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞

IR983F細胞類似產(chǎn)品：：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞

WiDr細胞類似產(chǎn)品：：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞

JeKo 1細胞類似產(chǎn)品：：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞

OC 316細胞類似產(chǎn)品：：SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞

MNNG-HOS (Cl#5)細胞類似產(chǎn)品：：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞

RPMI7666細胞類似產(chǎn)品：：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞

P3X63 Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞

HBVP細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞

CEM C7細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞

H1573細胞類似產(chǎn)品：：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞

KTC-1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞

293FT細胞類似產(chǎn)品：：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞

IEC 18細胞類似產(chǎn)品：：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞

Panc02.03細胞類似產(chǎn)品：：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞

BNL 1MEA.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞

HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細胞

HFL-I細胞類似產(chǎn)品：：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞

U266 B1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞

HR1K細胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞

JB6 clone 30, subclone 7b細胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞

293GP細胞類似產(chǎn)品：：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞

UWB1289細胞類似產(chǎn)品：：A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞

HHFK細胞類似產(chǎn)品：：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞

MM1-S細胞類似產(chǎn)品：：NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞

MM1-S細胞類似產(chǎn)品：：NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞

M-14細胞類似產(chǎn)品：：SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞

TMD-8細胞類似產(chǎn)品：：293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞

OLN-93細胞類似產(chǎn)品：：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞

NCI-SNU-449細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞

T-HSC細胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞

BC-023細胞類似產(chǎn)品：：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞

YTMLC-90細胞類似產(chǎn)品：：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞

NCI-H774細胞類似產(chǎn)品：：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞

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