"JCA-1 Cell|人前列腺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

RPMI1788細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞

Human Kidney-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1975細胞、NCI-H1651細胞、EAHY-926細胞

Walker256-TC細胞類似產(chǎn)品：：WM239細胞、MCA 38細胞、Hs 746.T細胞

PL-45細胞類似產(chǎn)品：：KPNRTBM1細胞、MN60細胞、HCa/16A3-F細胞

H28細胞類似產(chǎn)品：：TNC-1B12B4細胞、OAW 42細胞、159 PT細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

JCA-1 Cell|人前列腺癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

RAOEC細胞類似產(chǎn)品：：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞

NALM-6細胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞

KNS-62細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞

BV-2細胞類似產(chǎn)品：：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

RAOEC細胞類似產(chǎn)品：：KNS62細胞、WSU-HN13細胞、H-1355細胞

NALM-6細胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞

KNS-62細胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞

BV-2細胞類似產(chǎn)品：：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

COLO 824細胞類似產(chǎn)品：：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞

UM-UC-3細胞類似產(chǎn)品：：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞

BEL-7405細胞類似產(chǎn)品：：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞

IMCD3細胞類似產(chǎn)品：：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞

RMC-1細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞

SACC-83細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞

CTV-1細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞

CORL23細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞

NE-1細胞類似產(chǎn)品：：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞

AKR細胞類似產(chǎn)品：：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞

JCA-1 Cell|人前列腺癌細胞

LM2-4175細胞類似產(chǎn)品：：Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞

M059J細胞類似產(chǎn)品：：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞

MC3T3-E1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞

KHYG1細胞類似產(chǎn)品：：no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞

KALS-1細胞類似產(chǎn)品：：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞

870細胞類似產(chǎn)品：：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞

870細胞類似產(chǎn)品：：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞

CNE細胞類似產(chǎn)品：：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞

UCLA RO-81A-1細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞

CCLP1細胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞

UCLA SO M21細胞類似產(chǎn)品：：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞

OV-2008細胞類似產(chǎn)品：：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞

NCI-H1385細胞類似產(chǎn)品：：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞

T47-D細胞類似產(chǎn)品：：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞

TGW-I-nu細胞類似產(chǎn)品：：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞

H441細胞類似產(chǎn)品：：HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞

IPLB-SF 21AE細胞類似產(chǎn)品：：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞

H.Ep.-2細胞類似產(chǎn)品：：SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞

MT-2細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞

LOU-NH-91細胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞

SKMEL28細胞類似產(chǎn)品：：Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞

SKMEL2細胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞

NCI.H522細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞

HARAB細胞類似產(chǎn)品：：EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞

Roswell Park Memorial Institute 6666細胞類似產(chǎn)品：：BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞

MDAMB-231細胞類似產(chǎn)品：：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞

IHH-4細胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞

Vero 76 clone E-6細胞類似產(chǎn)品：：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞

H596細胞類似產(chǎn)品：：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞

JCA-1 Cell|人前列腺癌細胞

UMR106細胞類似產(chǎn)品：：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞

C1498細胞類似產(chǎn)品：：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞

NE-4C細胞類似產(chǎn)品：：PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞

MRC-V細胞類似產(chǎn)品：：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞

HB 611細胞類似產(chǎn)品：：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞

HT(H9)細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞

OE-19細胞類似產(chǎn)品：：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞

HG2855細胞類似產(chǎn)品：：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞

Pfeiffer細胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞

SKMel-28細胞類似產(chǎn)品：：Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞

BEL-7404細胞類似產(chǎn)品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

293 Ad5細胞類似產(chǎn)品：：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞

HNE-1細胞類似產(chǎn)品：：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞

BALB/3T3 cl. A31細胞類似產(chǎn)品：：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞

PC 61細胞類似產(chǎn)品：：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞

T-47-D細胞類似產(chǎn)品：：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞

MHCC97L細胞類似產(chǎn)品：：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞

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