"COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NCI-BL1339細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞

HS766T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTLL(2)細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞

SK-CO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1734細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、GB1細(xì)胞

HMC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-1Sq細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞

8505C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NOR10細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤(pán)皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

C3H/10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞

SNU398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞

SNU-638細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞

Capan2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

C3H/10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞

SNU398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞

SNU-638細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞

Capan2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H1238細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞

PLC8024細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞

LNT-229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞

HS688AT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞

HEK293EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞

HSC（Human Schwann）細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞

alpha TC1.6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞

SW1222細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞

EC-GI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞

KYSE510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞

COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細(xì)胞

Sp2/mIL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAPCa2b細(xì)胞、WM239A細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞

3T3J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞

CD-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞

ST細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞

SKMel-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞

SKMel-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WC00097細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞、HL-1細(xì)胞

CCD841CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞

Adeno 293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-824細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞

GM03570細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Onda 11細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞

EJ-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞

SV40-HCEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞

SK MES 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.3細(xì)胞、D-283MED細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞

SU-DHL-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞

Ramos 2G6.4C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞

C8161細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞

GM02219C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞

SK-MEL-24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞

Karpas-422細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞

JB 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞

AU 565細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞

NCI-BL1339細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞

Panc-3_27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞

CNE-2Z細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞

Th17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞

HM06.A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞

IGROV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞

TNC-1B12B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞

COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細(xì)胞

HPB/ALL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞

MIO-M1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞

INS-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALL1細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞

COLO-320-DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞

Opossum Kidney細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞

P3J HR-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞

LLCPK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞

H2171細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS513細(xì)胞、293T/17細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞

SK-MES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞

A549ATCC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1435細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞、RGB細(xì)胞

H-1819細(xì)胞類似產(chǎn)品：：5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞

P3J-HR-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞

KU.812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞

OVCAR3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞

L-cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞

H774細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞

SDBMSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞

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