"BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

SK-RC-39細胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞

P-388D1細胞類似產(chǎn)品：：OV1063細胞、D341 Med細胞、TE-4細胞

UPCI-SCC-154細胞類似產(chǎn)品：：C-28/I2細胞、H-727細胞、BPH-1細胞

Mono Mac6細胞類似產(chǎn)品：：138 MG細胞、SK-N-BE(1)n細胞、SKOV3細胞

TE-10細胞類似產(chǎn)品：：NCI H2106細胞、LTEPa2細胞、P388-D1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Hs 888.Lu細胞類似產(chǎn)品：：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞

HuT 78細胞類似產(chǎn)品：：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞

ZR-75-1細胞類似產(chǎn)品：：H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞

H650細胞類似產(chǎn)品：：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Hs 888.Lu細胞類似產(chǎn)品：：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞

HuT 78細胞類似產(chǎn)品：：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞

ZR-75-1細胞類似產(chǎn)品：：H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞

H650細胞類似產(chǎn)品：：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

Functional Liver Cell-7細胞類似產(chǎn)品：：OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞

SGC 7901細胞類似產(chǎn)品：：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞

LK 2細胞類似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞

ROS17/28細胞類似產(chǎn)品：：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞

H4細胞類似產(chǎn)品：：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞

2BS細胞類似產(chǎn)品：：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞

Walker-Ca.256細胞類似產(chǎn)品：：Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞

Walker-256細胞類似產(chǎn)品：：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞

H-446細胞類似產(chǎn)品：：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞

MNNG-HOS細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞

BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細胞

SMA-560細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞

B16/F1細胞類似產(chǎn)品：：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞

COLO 741細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞

L cell細胞類似產(chǎn)品：：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞

LCD細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞

YES-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞

YES-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H889細胞、OCI-LY-18細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞

EFM-192B細胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞

LTEPa2細胞類似產(chǎn)品：：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞

SNT-8細胞類似產(chǎn)品：：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞

Madin-Darby Bovine Kidney細胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞

OCILY10細胞類似產(chǎn)品：：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞

MC 3T3-E1細胞類似產(chǎn)品：：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞

BC3 H1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞

RBSMC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞

MeT-5A細胞類似產(chǎn)品：：A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞

FTC-133細胞類似產(chǎn)品：：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞

DKMG細胞類似產(chǎn)品：：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞

D324 Med細胞類似產(chǎn)品：：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞

A549/DDP細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞

KYSE-150細胞類似產(chǎn)品：：BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞

B16 BL6細胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞

P30-OHK細胞類似產(chǎn)品：：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞

H23細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞

OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞

D-324 Med細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞

SJ-RH30細胞類似產(chǎn)品：：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞

CHO Lec1細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞

PLC細胞類似產(chǎn)品：：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞

BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細胞

NIH:OVCAR4細胞類似產(chǎn)品：：Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞

My-La 2059細胞類似產(chǎn)品：：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞

COLO320HSR細胞類似產(chǎn)品：：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞

RCS細胞類似產(chǎn)品：：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞

T24細胞類似產(chǎn)品：：KCL22S細胞、GA-10細胞、UCLA-RO 81細胞

SW 900細胞類似產(chǎn)品：：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞

LA795細胞類似產(chǎn)品：：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞

HIT T15細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞

HIT T15細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞

KYSE 180細胞類似產(chǎn)品：：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞

CHO K1細胞類似產(chǎn)品：：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞

KAT-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞

MN-60細胞類似產(chǎn)品：：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞

T241細胞類似產(chǎn)品：：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞

OV3121細胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞

CAL 51細胞類似產(chǎn)品：：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞

Y3-Ag1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞

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