"FET Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：結(jié)腸癌

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。

細(xì)胞生長：貼壁

MCF10A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細(xì)胞、GP5d細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞

SP2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD1095Sk細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、HT 144細(xì)胞

Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細(xì)胞、H3255細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞

Y3Ag1.2.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKLMS1細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞

Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL-92細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

FET Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

BEL-7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞

U118-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞

Strain L-929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞

KP-N-NS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

BEL-7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞

U118-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞

Strain L-929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞

KP-N-NS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H211細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞

SNUC2A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞

Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 6細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞、LN-229細(xì)胞

WC00044細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞

ES2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI AML5細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞

OCI/AML-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞

SAS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞

H-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞

NCI-H524細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞

H-1436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞

FET Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

VMM5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NuTu 19細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞、EM3細(xì)胞

H-526細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞

MGHU1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞

MIA PaCa-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞

UMRC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞

H-716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞

H-716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞

A2780/Taxol細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞

H378細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 8994細(xì)胞、H-929細(xì)胞、293H細(xì)胞

Calu3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞

RLE-6TN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞

MeSoTheliOma-211H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞

TNC-1B12B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞

Panc 2.03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CC-LP-1細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞

HOS-MNNG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞

H-660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞

D-324 Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞

P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞

PBMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞

CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞

NK-92.05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞

COR-L105細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC1細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞

VK-2/E6E7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-445細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞、GLC82細(xì)胞

SK-RC 42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞

HR-8348細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞

PC3M-2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO684細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞

5-8F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞

NCIH2085細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞

SK-Hep1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞

FET Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

DoTc2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞

TE 85 ClF-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞

National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞

HPMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞

P388-D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞

COLO 699細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞

H1618細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞

R D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞

AHH-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞

TE-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞

NT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞

E304細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞

CMT 167細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞

A2780CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞

TE353.SK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞

CHO-ori細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞

NTera2/D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞

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