"NCI-H250 Cell|人小細胞肺癌細胞

細胞背景資料：小細胞肺癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

NCI H82細胞類似產(chǎn)品：：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞

Tadarida brasiliensis 1 lung細胞類似產(chǎn)品：：JCA-1細胞、PGBE1細胞、S3 HeLa細胞

GA-10細胞類似產(chǎn)品：：NIH3T3-L1細胞、MC-38細胞、MDA-MB-175細胞

NCIH23細胞類似產(chǎn)品：：mIMCD-3細胞、RL細胞、H64細胞

ZR75-1細胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-80細胞、MC3T3-L1細胞、B78細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H250 Cell|人小細胞肺癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞類似產(chǎn)品：：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞

L929(NCTC)細胞類似產(chǎn)品：：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞

L 1210細胞類似產(chǎn)品：：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞

PLC-8024細胞類似產(chǎn)品：：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞類似產(chǎn)品：：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞

L929(NCTC)細胞類似產(chǎn)品：：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞

L 1210細胞類似產(chǎn)品：：BHP10-3細胞、NCI-SNU-5細胞、NCI-H2073細胞

PLC-8024細胞類似產(chǎn)品：：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞

細胞生長特性：半貼壁

細胞系（cell line）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。（由此便引申出了后來的有限細胞系（FiniteCellLine）、無限細胞系（InfiniteCellLine）），因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細胞。腫瘤細胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國際上美、英和日本等國已建有細胞庫；美國已有美國標(biāo)準(zhǔn)細胞庫或細胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細胞庫（HGMR）、細胞衰老細胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國也世界大的細胞庫。細胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認可為己鑒定的細胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對于用作原代培養(yǎng)的細胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長期培養(yǎng)，別是反復(fù)傳代的細胞，常需做如下說明：組織來源：細胞供體所屬物種，來自人體或者動物；個體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說明臨床和病理診斷，以及病歷號等。細胞生物學(xué)檢測：了解細胞一般和殊的生物學(xué)性狀，如細胞一般形態(tài)，異結(jié)構(gòu)，細胞生長曲線和分裂指數(shù)，倍增時間，接種率等。如為腫瘤細胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說明細胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

HO8910細胞類似產(chǎn)品：：HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞

MHCC 97-H細胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞

MJ細胞類似產(chǎn)品：：RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞

NCI H548細胞類似產(chǎn)品：：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞

Hs 578.T細胞類似產(chǎn)品：：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞

IOSE-Mar細胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞

SV40 MES 13細胞類似產(chǎn)品：：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞

HS688AT細胞類似產(chǎn)品：：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞

HUVEC-C[HUVEC]細胞類似產(chǎn)品：：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞

LN 382細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-FI細胞、T98G細胞、HuNS1細胞

NCI-H250 Cell|人小細胞肺癌細胞

MKN1細胞類似產(chǎn)品：：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞

SW480細胞類似產(chǎn)品：：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞

SKCO-1細胞類似產(chǎn)品：：FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞

H838細胞類似產(chǎn)品：：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞

SEM細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞

PK (15)細胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞

PK (15)細胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞

Pt K2 (NBL-5)細胞類似產(chǎn)品：：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞

FRTL 5細胞類似產(chǎn)品：：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞

HEK-293F細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞

BC-PAP細胞類似產(chǎn)品：：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞

MIHA細胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞

RM-1細胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞

HCC-1171細胞類似產(chǎn)品：：MCF-10A細胞、LNCaP.FGC細胞、FDC-P1細胞

NCIH209細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞

0V-1063細胞類似產(chǎn)品：：A2780S細胞、QGY 7701細胞、JB 6細胞

H69/P細胞類似產(chǎn)品：：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞

AHH-1細胞類似產(chǎn)品：：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞

B16-BL6細胞類似產(chǎn)品：：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞

CT26.WT細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞

NB-19細胞類似產(chǎn)品：：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞

P3J-HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞

UM-UC-1細胞類似產(chǎn)品：：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞

PE/CA-PJ34細胞類似產(chǎn)品：：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞

H865細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞

NB-9細胞類似產(chǎn)品：：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞

NL20SV細胞類似產(chǎn)品：：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞

NBL-7細胞類似產(chǎn)品：：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞

Molm14細胞類似產(chǎn)品：：CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞

NCI-H250 Cell|人小細胞肺癌細胞

D341細胞類似產(chǎn)品：：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞

UMRC2細胞類似產(chǎn)品：：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞

293/EBNA-1細胞類似產(chǎn)品：：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞

HT3細胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞

GNM細胞類似產(chǎn)品：：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞

HCS2/8細胞類似產(chǎn)品：：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞

SF 539細胞類似產(chǎn)品：：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞

G361細胞類似產(chǎn)品：：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞

HC-11細胞類似產(chǎn)品：：Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞

HVSMC細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞

SUDHL1細胞類似產(chǎn)品：：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞

Lu99A細胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

FHL124細胞類似產(chǎn)品：：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞

JB6 Cl 30-7b細胞類似產(chǎn)品：：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞

RK 13細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞

R.K.13細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞

Human Embryo Kidney-2細胞類似產(chǎn)品：：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞

"